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摘要：目的：对此次暴发细菌性痢疾的原因进行调查，为以后类似病情的处理与预防提供参考依据。方法：进行现场流行病学和卫生学调查，采集饮用水、病人大便及肛拭子、双份血清进行相关检验。结果：饮用水微生物指标严重超标，耐热大肠菌群和大肠埃希氏菌均>1600 MPN/100ml，提示井水粪便污染严重。从23份患者大便及肛拭子中分离出6株福氏志贺氏菌4c型。结论：这是一起由于井水被福氏志贺氏菌病人粪便污染，而引起的细菌性痢疾爆发疫情。
关键词：细菌性痢疾暴发实验室检测
Doi:10.3969/j.issn.1671-8801.2014.08.613【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801(2014)08-0371-02
2012年10月4日起，湖南某市一施工工地工人先后出现不同程度、不明原因的腹泻，至10月9日共有23人发病。接到报告后，疾控机动队立即赶赴现场，对患者和环境进行流行病学和卫生学调查，同时采集相关标本进行检验。依据流行病学调查、临床特征及實验室检测结果，证实为一起细菌性痢疾引起的暴发疫情，现将结果报告如下。
1流行病学调查资料
疫情发生在某村一建筑工地上，10月4日有一民工出现腹泻、里急后重、脓血便和发热现象，体温39.4℃，并于当天住院治疗。此以后民工中陆续出现腹泻现象。截至10月9日调查之日，已有23人先后发病。经调查发现，该工地无食堂，民工不在工地集体就餐，各自在自家中早餐后出工，晚上回家用晚餐，工作期间均在工地饮用一附近外出打工农民家井水，水井有盖，密封性差，井口地势低，周围杂草丛生，环境条件较差。
2临床特征
26名民工中，有23人发病，首诊病人临床表现：发热、腹痛、腹泻（脓血便）。大便检查：红细胞+、白细胞++、O2菌初检阴性。仅有3人未发病。调查的23名患者中，腹痛腹泻23/23，占100%；里急后重11/23，占47.8%；黄稀样便9/23，占39.1%；粘液脓血便5/23，占21.7%；腹痛6/23，占26.1%。经抗生素和对症治疗后，患者全部康复出院。
3实验室检查
3.1样品来源：病人大便及肛拭子23份，生活饮用水4份，13份患者双分血清。
3.2培养基及诊断血清。①生化管及分离鉴别培养基和革兰氏染色液：由中国进出口商品检验技术研究所，北京陆桥技术有限责任公司生产，均在有效期内使用。②博检革兰氏阴性菌鉴定系统生化反应条：青岛海博生物科技有限公司提供，批号：20120501，有效期20130506。③志贺氏菌诊断血清（20种）由宁波天润生物药业有限公司生产，批号20120101，有效期至20140103。④药敏板由湖南长沙天地人生物科技有限公司生产，有效期内使用。
3.3检验方法及项目。水样依据GB/T5750-2006《生活饮用水标准检验方法》进行菌落总数 、总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌；其它样品参照GB/T4789.5-2003《食品卫生微生物学检验》[1]、《微生物和微生物学检验》[2]等进行志贺菌检测。
4实验室检验结果
4.1可疑菌株形态、染色与培养特性：G—杆菌、无芽胞、无荚膜。营养肉汤中均匀混浊生长。普通营养琼脂：圆形、凸起、边缘整齐、光滑、湿润、无色、中等大小菌落；MAC：无色不透明菌落；EMB：无色不透明菌落；SS：无色不透明菌落；XLD：红色菌落。
4.2生化反应结果。博检革兰氏阴性菌鉴定系统编码查询为福氏志贺菌，结果见表1。
表1博检革兰氏阴性菌鉴定系统结果
生化反应结果生化反应结果生化反应结果β-半乳糖苷酶—葡萄糖+吲哚—精氨酸—甘露醇+VP—赖氨酸—肌醇—明胶—鸟氨酸—山梨醇—枸椽酸盐—尿素酶—鼠李糖—硫化氢—乳糖—蔗糖—蜜二糖—苦杏仁苷—阿拉伯糖+氧化酶—手工生化结果与志贺菌结果相符。
4.3血清学试验。对分纯的菌株用志贺氏菌诊断血清进行玻片凝集试验后，结果显示：志贺氏菌四种多价（++）、福氏多价（++）、福氏1型（-）福氏2型（-）、福氏3型（-）、福氏4型（++）、群3，4（-）、群6（-）、群7（++），盐水对照（-）。该菌血清型为福氏4c型。
4.4井水常规卫生微生物指标见表2。
表2井水常规卫生微生物指标检测结果
编号菌落总数
（cfu/ml）总大肠菌群
（MPN/100ml）耐热大肠菌群
（MPN/100ml）大肠埃希氏菌
（MPN/100ml）龙头水3500>1600>1600>1600水箱水2400>1600>1600>1600井水（处理前）1800>1600>1600>1600井水（处理后）1<2--4.5大便及肛拭子、血液检测结果。23份肛拭子及大便中6份检出福氏志贺氏菌4c型，其余样品均未检出志贺菌。用分离到的志贺氏菌制成悬液，分别对13份发病初期和恢复期的血清进行抗体滴度测定，结果恢复期的抗体效价较发病初期的抗体效价均有4倍以上升高。
5讨论
5.1典型的细菌性痢疾表现为腹痛、发热、大量水样便，有里急后重现象[1]。本次调查的23名患者的临床，典型又从23份病人肛拭子及大便中6份检出福氏志贺氏菌4c型。因此，判定此次不同程度的腹泻事件为福氏志贺氏菌4c型所致。
5.226名民工有23名发病，仅3名未发病，可能系个体体质差异。从23名病人的肛拭子及大便中仅检出6份福氏志贺氏菌4c型，经调查，很多人已用药，错过了最佳检出时机。但13份双份血清效价均有4倍升高。说明13名民工均受福氏志贺氏菌4c型感染。
5.3根据细菌培养特征、染色形态、生化反应、血清凝集试验结果，符合《检出菌为福氏志贺氏菌4c型（F4c）》[2]，与2005年邵阳流行株相同[3]，谋市和邵阳为相邻地区，可能是邵阳流行株几年后传入了该市。
5.4龙头水、水箱水、未处理的井水微生物指标均严重超标，耐热大肠菌群和大肠埃希氏菌均>1600 MPN/100ml，说明井水受粪便污染严重。由流行病学调查发现，所有发病人员共饮同一水源，而无共同进餐史，所以本次细菌性痢疾爆发极有可能是由井水污染引起。但从水中未检出志贺菌，分析可能原因一是报告时间晚，失去了最佳检出时机；二是样品未进行有效的前处理，使检测结果为阴性。建议今后此类水质检测，使用纱布集菌法采样或滤膜集菌法富集后再进行致病菌分离，以提高阳性检出率。
5.5本次志贺菌与浙江衢州地区[4]和北京昌平地区[5]报道一致。由于交通的日益发达，给致病菌借交通工具传播提供了可乘之机，加上民工卫生知识贫乏，饮水的卫生监管难以到位，极易造成传染病的爆发流行。建议在农村广泛开展健康教育宣传，提高民众的防病意识，养成良好的卫生习惯，防止病从口入。参考文献
[1]刘恭植.微生物和微生物学检验[M]，人民卫生出版社
[2]江倔,李真,吴改玲等.门诊细菌性痢疾志贺菌检测结果分析[J].中国全科医学,2010,13(1):47-49
[3]罗燕等.邵阳市首次检出福氏4c志贺氏菌（新菌型）[J].实用预防医学，2006,13（4）:1021-1022
[4]杨瑞军等,衢州地区2007-2008年菌痢分离株的血清分布[J].中国卫生检验杂志,2009(10):2386-2387,2396
[5]牛桓彩等.2006-2008昌平地区细菌性痢疾病原学监测结果分析[J].中国卫生检验杂志,2010(1):159-161
关键词：细菌性痢疾暴发实验室检测
Doi:10.3969/j.issn.1671-8801.2014.08.613【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801(2014)08-0371-02
2012年10月4日起，湖南某市一施工工地工人先后出现不同程度、不明原因的腹泻，至10月9日共有23人发病。接到报告后，疾控机动队立即赶赴现场，对患者和环境进行流行病学和卫生学调查，同时采集相关标本进行检验。依据流行病学调查、临床特征及實验室检测结果，证实为一起细菌性痢疾引起的暴发疫情，现将结果报告如下。
1流行病学调查资料
疫情发生在某村一建筑工地上，10月4日有一民工出现腹泻、里急后重、脓血便和发热现象，体温39.4℃，并于当天住院治疗。此以后民工中陆续出现腹泻现象。截至10月9日调查之日，已有23人先后发病。经调查发现，该工地无食堂，民工不在工地集体就餐，各自在自家中早餐后出工，晚上回家用晚餐，工作期间均在工地饮用一附近外出打工农民家井水，水井有盖，密封性差，井口地势低，周围杂草丛生，环境条件较差。
2临床特征
26名民工中，有23人发病，首诊病人临床表现：发热、腹痛、腹泻（脓血便）。大便检查：红细胞+、白细胞++、O2菌初检阴性。仅有3人未发病。调查的23名患者中，腹痛腹泻23/23，占100%；里急后重11/23，占47.8%；黄稀样便9/23，占39.1%；粘液脓血便5/23，占21.7%；腹痛6/23，占26.1%。经抗生素和对症治疗后，患者全部康复出院。
3实验室检查
3.1样品来源：病人大便及肛拭子23份，生活饮用水4份，13份患者双分血清。
3.2培养基及诊断血清。①生化管及分离鉴别培养基和革兰氏染色液：由中国进出口商品检验技术研究所，北京陆桥技术有限责任公司生产，均在有效期内使用。②博检革兰氏阴性菌鉴定系统生化反应条：青岛海博生物科技有限公司提供，批号：20120501，有效期20130506。③志贺氏菌诊断血清（20种）由宁波天润生物药业有限公司生产，批号20120101，有效期至20140103。④药敏板由湖南长沙天地人生物科技有限公司生产，有效期内使用。
3.3检验方法及项目。水样依据GB/T5750-2006《生活饮用水标准检验方法》进行菌落总数 、总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌；其它样品参照GB/T4789.5-2003《食品卫生微生物学检验》[1]、《微生物和微生物学检验》[2]等进行志贺菌检测。
4实验室检验结果
4.1可疑菌株形态、染色与培养特性：G—杆菌、无芽胞、无荚膜。营养肉汤中均匀混浊生长。普通营养琼脂：圆形、凸起、边缘整齐、光滑、湿润、无色、中等大小菌落；MAC：无色不透明菌落；EMB：无色不透明菌落；SS：无色不透明菌落；XLD：红色菌落。
4.2生化反应结果。博检革兰氏阴性菌鉴定系统编码查询为福氏志贺菌，结果见表1。
表1博检革兰氏阴性菌鉴定系统结果
生化反应结果生化反应结果生化反应结果β-半乳糖苷酶—葡萄糖+吲哚—精氨酸—甘露醇+VP—赖氨酸—肌醇—明胶—鸟氨酸—山梨醇—枸椽酸盐—尿素酶—鼠李糖—硫化氢—乳糖—蔗糖—蜜二糖—苦杏仁苷—阿拉伯糖+氧化酶—手工生化结果与志贺菌结果相符。
4.3血清学试验。对分纯的菌株用志贺氏菌诊断血清进行玻片凝集试验后，结果显示：志贺氏菌四种多价（++）、福氏多价（++）、福氏1型（-）福氏2型（-）、福氏3型（-）、福氏4型（++）、群3，4（-）、群6（-）、群7（++），盐水对照（-）。该菌血清型为福氏4c型。
4.4井水常规卫生微生物指标见表2。
表2井水常规卫生微生物指标检测结果
编号菌落总数
（cfu/ml）总大肠菌群
（MPN/100ml）耐热大肠菌群
（MPN/100ml）大肠埃希氏菌
（MPN/100ml）龙头水3500>1600>1600>1600水箱水2400>1600>1600>1600井水（处理前）1800>1600>1600>1600井水（处理后）1<2--4.5大便及肛拭子、血液检测结果。23份肛拭子及大便中6份检出福氏志贺氏菌4c型，其余样品均未检出志贺菌。用分离到的志贺氏菌制成悬液，分别对13份发病初期和恢复期的血清进行抗体滴度测定，结果恢复期的抗体效价较发病初期的抗体效价均有4倍以上升高。
5讨论
5.1典型的细菌性痢疾表现为腹痛、发热、大量水样便，有里急后重现象[1]。本次调查的23名患者的临床，典型又从23份病人肛拭子及大便中6份检出福氏志贺氏菌4c型。因此，判定此次不同程度的腹泻事件为福氏志贺氏菌4c型所致。
5.226名民工有23名发病，仅3名未发病，可能系个体体质差异。从23名病人的肛拭子及大便中仅检出6份福氏志贺氏菌4c型，经调查，很多人已用药，错过了最佳检出时机。但13份双份血清效价均有4倍升高。说明13名民工均受福氏志贺氏菌4c型感染。
5.3根据细菌培养特征、染色形态、生化反应、血清凝集试验结果，符合《检出菌为福氏志贺氏菌4c型（F4c）》[2]，与2005年邵阳流行株相同[3]，谋市和邵阳为相邻地区，可能是邵阳流行株几年后传入了该市。
5.4龙头水、水箱水、未处理的井水微生物指标均严重超标，耐热大肠菌群和大肠埃希氏菌均>1600 MPN/100ml，说明井水受粪便污染严重。由流行病学调查发现，所有发病人员共饮同一水源，而无共同进餐史，所以本次细菌性痢疾爆发极有可能是由井水污染引起。但从水中未检出志贺菌，分析可能原因一是报告时间晚，失去了最佳检出时机；二是样品未进行有效的前处理，使检测结果为阴性。建议今后此类水质检测，使用纱布集菌法采样或滤膜集菌法富集后再进行致病菌分离，以提高阳性检出率。
5.5本次志贺菌与浙江衢州地区[4]和北京昌平地区[5]报道一致。由于交通的日益发达，给致病菌借交通工具传播提供了可乘之机，加上民工卫生知识贫乏，饮水的卫生监管难以到位，极易造成传染病的爆发流行。建议在农村广泛开展健康教育宣传，提高民众的防病意识，养成良好的卫生习惯，防止病从口入。参考文献
[1]刘恭植.微生物和微生物学检验[M]，人民卫生出版社
[2]江倔,李真,吴改玲等.门诊细菌性痢疾志贺菌检测结果分析[J].中国全科医学,2010,13(1):47-49
[3]罗燕等.邵阳市首次检出福氏4c志贺氏菌（新菌型）[J].实用预防医学，2006,13（4）:1021-1022
[4]杨瑞军等,衢州地区2007-2008年菌痢分离株的血清分布[J].中国卫生检验杂志,2009(10):2386-2387,2396
[5]牛桓彩等.2006-2008昌平地区细菌性痢疾病原学监测结果分析[J].中国卫生检验杂志,2010(1):159-161