【摘 要】
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目的探究呼吸系统常见致病菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S. aureus)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumonia,S. pneumonia)不同成分对人呼吸道肺泡Ⅱ型上皮细胞(A5
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81770049);北京市自然科学基金(7192023)~~
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目的探究呼吸系统常见致病菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S. aureus)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumonia,S. pneumonia)不同成分对人呼吸道肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549细胞)结构与功能的影响。方法 A549细胞分别与S.aureus、S. pneumonia细菌培养上清、细菌裂解物及灭活菌体共培养,采用CCK8方法检测上述不同细菌成分对A549细胞增殖功能的影响,采用流式细胞术(flow cytometry)检测不同刺激物诱导细胞发生凋亡与坏死的作用,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其对炎症细胞因子白细胞介素6、白细胞介素8(IL-6、IL-8)分泌的影响,利用Western blot及细胞免疫荧光染色方法探究不同刺激成分对A549细胞紧密连接蛋白ZO-1、Claudin1、Occludin表达的影响。结果两种细菌培养上清及S. pneumonia裂解物可显著抑制A549细胞增殖并诱导细胞出现凋亡和坏死现象(P<0.05);两种细菌培养上清及细菌裂解物均可促进上皮细胞分泌IL-6,且两种细菌培养上清及S. pneumonia裂解物亦可促进上皮细胞分泌IL-8;两种细菌培养上清及各成分,仅S. aureus灭活菌体可降低紧密连接蛋白ZO-1的表达,但其对另外两种紧密连接蛋白Claudin1和Occludin的表达无显著影响。结论两种细菌感染过程中,不同细菌及细菌的不同成分对上皮细胞作用并不完全相同。细菌培养上清和细菌裂解物主要影响上皮细胞增殖、炎症因子分泌等功能,S. aureus灭活菌体可降低紧密连接蛋白ZO-1的表达进而影响上皮细胞间紧密连接的完整性。
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