【摘 要】
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目的:基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/天冬氨酸蛋白水解酶-1（NLRP3/Caspase-1）信号通路探讨熊果酸促进肝癌SMMC-7721细胞焦亡作用机制。方法:培养肝癌SMMC-7721细胞，以熊果酸0、30、40、50μmol/L干预，电镜观察细胞焦亡时的形态变化；噻唑蓝比色（MTT）法测定细胞24 h体外增殖的影响；Hoechst 33242染色法荧光显微镜下观察细胞焦亡情况；集落形
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（编号：8177413）； 陕西中医药大学学科创新团队建设项目（项目编号：2019-YS05）；
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目的:基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/天冬氨酸蛋白水解酶-1（NLRP3/Caspase-1）信号通路探讨熊果酸促进肝癌SMMC-7721细胞焦亡作用机制。方法:培养肝癌SMMC-7721细胞，以熊果酸0、30、40、50μmol/L干预，电镜观察细胞焦亡时的形态变化；噻唑蓝比色（MTT）法测定细胞24 h体外增殖的影响；Hoechst 33242染色法荧光显微镜下观察细胞焦亡情况；集落形成实验（Clonogenicity assay）观察熊果酸对人肝癌SMMC-7721细胞集落形成能力的影响；流式细胞术分析熊果酸对人肝癌SMMC-7721细胞周期的影响；免疫印迹（Western-Blot）法检测Caspase-1、NLRP3和GSDMD-N蛋白表达。结果:不同浓度熊果酸作用肝癌SMMC-7721细胞24 h后，显示熊果酸可抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖，且随着药物浓度的增加，抑制作用显著增强（P＜0.01）;随着熊果酸浓度的不断增加，细胞焦亡数量显著增加（P＜0.01）;随着熊果酸浓度的不断增加，细胞集落形成能力明显下降（P＜0.05）;30μmol/L的熊果酸作用于肝癌SMMC-7721细胞，细胞出现不同程度的肿胀，细胞膜破裂且有孔洞形成等典型的焦亡形态学特征；不同浓度熊果酸干预肝癌SMMC-7721细胞24 h,可上调NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达（P＜0.05）。结论:熊果酸能抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖、集落形成，促进肝癌细胞焦亡；熊果酸诱导肝癌SMMC-7721细胞焦亡可能与其上调Caspase-1和NLRP3蛋白表达有关。
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