【摘 要】
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目的 建立聚合酶螺旋反应双指示法检测结核分枝杆菌,满足现场监测和快速检测的需求.方法 基于结核分枝杆菌聚合酶螺旋反应体系,利用BstDNA聚合酶链置换活性,在同一反应体系中
【机 构】
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中国检验检疫科学研究院卫检所,北京100176;中国人民解放军疾病预防控制中心
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目的 建立聚合酶螺旋反应双指示法检测结核分枝杆菌,满足现场监测和快速检测的需求.方法 基于结核分枝杆菌聚合酶螺旋反应体系,利用BstDNA聚合酶链置换活性,在同一反应体系中加入核酸荧光染料EveGreen和pH显色剂两种指示物,用实时荧光法和可视显色法同时判断反应结果,用于痰样本中结核分枝杆菌的检测.结果 建立的双指示法对结核分枝杆菌核酸最低检测浓度均为10 pg/μl,可在65 min内得到结果,敏感性和特异性良好,与金黄色葡萄球菌、福氏志贺菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌均无交叉反应.结论 建立的聚合酶螺旋反应双指示检测法为结核分枝杆菌的快速检测提供了新方法.
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