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目的研究慢病毒载体介导绿色荧光蛋白（GFP）转染犬脂肪干细胞（ADSCs）的理想条件，检测转染后细胞的生物学特性及分化能力。方法酶消化法获取ADSCs ，流式细胞技术检测细胞表面抗原，慢病毒载体介导GFP以50、100、150和200的感染复数（ MOI）作用24 h转染ADSCs，荧光显微镜及流式细胞检测荧光强度和转染效率，CCK-8法检测转染对ADSCs生长和增殖的影响，将转染ADSCs经成肌诱导后，免疫荧光检测成肌细胞特异性抗原结蛋白（desmin）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达情况。结果流式细胞仪检测结果CD90、CD44、CD105表达均为阳性，CD34、CD45表达均为阴性，MOI为50、100、150和200，转染效率分别为75.88％、90.99％、97.42％和99.17％。 MOI为150时，转染对ADSCs增殖无明显影响。病毒转染ADSCs经成肌诱导分化后，表达desmin和α-SMA阳性。结论慢病毒载体介导的GFP能高效标记ADSCs，且标记后细胞的增殖分化能力无明显影响。