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探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)对小鼠睾丸间质瘤细胞(MLTC-1)上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达及细胞迁移、侵袭能力的影响。
方法选择0、10-7、10-6、10-5、10-4、10-3 mol/L浓度的MBP分别处理MLTC-1细胞24 h和48 h后,收集处理后细胞。采用噻唑蓝(MTT)实验检测细胞活性,Western blot检测EMT相关蛋白波形蛋白、E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白和Snail的表达,划痕实验及Transwell细胞侵袭实验探讨MBP对MLTC-1细胞迁移和侵袭能力的影响。
结果使用10-7、10-6 mol/L的MBP对MLTC-1细胞染毒时,波形蛋白、转录因子Snail、N-钙黏着蛋白表达上调[相对表达量分别为(1.56±0.07)比(1.78±0.08)、(1.22±0.06)比(1.44±0.07)、(1.33±0.11)比(2.19±0.06),P值均<0.001];E-钙黏着蛋白的相对表达量分别为(0.66±0.09)比(0.47±0.06),表达下调(P<0.001)。划痕实验显示,分别以0、10-7、10-6 mol/L MBP染毒24 h后,细胞划痕愈合能力明显提高,愈合率分别为(6.64±2.07)%、(15.61±2.83)%、(39.91±0.33)%,P值均<0.001。Transwell实验显示,使用0、10-7、10-6 mol/L浓度的MBP染毒后,各组穿过Matrigel胶的细胞数与对照组相比明显增加,24 h侵袭细胞数(32.67±3.51)、(57.67±2.52)、(82.67±6.51)个/每3个视野,P值均<0.001。
结论MBP影响了MLTC-1细胞EMT相关蛋白的表达,促进了MLTC-1细胞的迁移和侵袭。