【摘 要】
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目的:克隆人内皮抑素基因,获得初步表达产物,为进一步研究打下基础.方法:用RT-PCR方法从中国汉族人正常肝组织扩增出内皮抑素cDNA,T/A插入pUCm-T载体,测序,再插入表达载体pKP
【机 构】
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重庆医科大学基础医学院生物化学教研室
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目的:克隆人内皮抑素基因,获得初步表达产物,为进一步研究打下基础.方法:用RT-PCR方法从中国汉族人正常肝组织扩增出内皮抑素cDNA,T/A插入pUCm-T载体,测序,再插入表达载体pKPL-3a,转化大肠杆菌POP2136,42℃诱导表达,SDS-PAGE分析表达蛋白.结果:中国人内皮抑素cDNA开放阅读框架全长552bp,编码184个氨基酸,其85位谷氨酸和98位天冬氨酸密码子的第三位碱基出现改变,但编码的氨基酸不变.结论:构建了中国人内皮抑素的克隆载体和表达载体,初步表达了约20kD人重组内皮抑素
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