鸡B-F2基因真核表达系统的建立与鉴定

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鸡B-F2基因编码的主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类分子α链在递呈内源性抗原中起重要作用.本研究应用RT-PCR方法从鸡外周血单核细胞中扩增了B-F2基因片段,其大小为1 068 bp.进一步将其定向插入真核表达载体,构建重组质粒pEGFP-N1-B-F2.经脂质体法转染COS7,所表达的α链定位于在细胞的浆膜,同时转染P815细胞,经G418的筛选(0.6 mg/mL)得到稳定表达细胞株.该细胞株经培养10代次后,仍在RT-PCR中能获得相应DNA片段.上述结果表明,B-F2基因在动物真核表达系统得到表达,建立的P815(B-F2)细胞株为进一步研究MHCⅠ类分子α链在免疫应答中作用奠定了基础.
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