JSK对糖-氧剥夺/复氧后大鼠脊髓星形胶质细胞体积及AQP4表达的影响

来源 :中国脊柱脊髓杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ilfang456
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目的:观察细胞骨架稳定剂(Jasplakinolide,JSK)对糖-氧剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation andreoxygenation,OGD/Reox)后大鼠脊髓星形胶质细胞体积及水通道蛋白-4 (aquaporin-4,AQP4)表达的影响,并探讨其可能机制.方法:体外培养取自大鼠脊髓的星形胶质细胞,将传代2~3次后的星形胶质细胞行糖-氧剥夺5h后再复氧,复氧同时将不同浓度(20、50、100、200和400nM)的JSK分别加入培养液继续培养12h,对照组用等量DMSO处理.用共聚焦显微镜和Western blot分析观测不同时间点(0.5h~12h)及不同浓度JSK作用下星形胶质细胞体积变化和AQP4表达情况,同时观察肌动蛋白微丝聚合(filament actin,F-actin)变化情况,分析其可能机制.结果:在OGD/Reox后,与对照组比较,0.5h后星形胶质细胞的体积开始增加,1.5h后达峰值(9.44±0.27 vs 5.06±0.26,P<0.05);50nM浓度JSK可明显减轻星形胶质细胞肿胀的严重程度(5.72±0.96,P<0.05).OGD/Reox后AQP4蛋白表达明显增加,在复氧1.5h时达到峰值(1.21±0.029 vs 0.20±0.013,P<0.01).JSK处理显著降低了AQP4蛋白水平的升高(1.25±0.19 vs 2.01±0.26,P<0.01).分析表明JSK聚合的F-actin微丝是导致细胞膜AQP4下调的原因.结论:应用JSK可以减轻OGD/Reox引起的大鼠脊髓星形胶质细胞肿胀,其保护作用可能与其能重组F-actin微丝和抑制AQP4蛋白表达有关.
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