以二氧化硅快速提取HBV-DNA用于双阶变温PCR检测

来源 :中山医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:DDD1968
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以异硫氰酸胍裂解血清释放核酸使被二氧化硅吸附,经乙醇洗涤后用水悬浮,上清即含纯化DNA。结合双阶变温PCR建立一种简单快速的血清HBV-DNA检测方法。该法只需检测10ul血清,完成提取和扩增只要3h.操作很易掌握。用之检测56例HBsAg+/HBeAg+的血清、42例HBsAg+/HBeAg-的血清和54例HBsAg/HBeAg的血清,结果HBV-DNA检出率分别为86%、57%和13%。应用表明这是一种简捷有效的核酸纯化和扩增方法,适于对大量临床样本作检测之用。 The guanidine isothiocyanate cleavage of serum release of nucleic acid adsorption by silica, washed with ethanol and suspended in water, the supernatant containing purified DNA. A simple and rapid serum HBV-DNA detection method was established by using two-step PCR. The method only detects 10ul serum, complete extraction and amplification as long as 3h. Operation is easy to grasp. Fifty-six serum samples of HBsAg + / HBeAg +, 42 serum samples of HBsAg + / HBeAg- and 54 serum samples of HBsAg / HBeAg were detected. The detection rates of HBV-DNA were 86%, 57% and 13% respectively. Application shows that this is a simple and effective nucleic acid purification and amplification method, suitable for a large number of clinical samples for testing.
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