肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10转基因载体的构建和鉴定

来源 :胃肠病学和肝病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qjunp
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目的构建小鼠肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10的转基因载体pALB—PEG10-EGFP,为制备转基因小鼠做准备。方法RT—PCR扩增PEG10基因cDNA序列,克隆入T载体进行酶切、测序鉴定,后将其定向克隆至真核表达载体pALB.EGFP中ALB的下游,构建转基因载体pALB—PEG10-EGFP;在Lipofectamine介导下转染L02细胞,经G418抗性筛选,挑选阳性克隆并扩大培养;采用RT—PCR、Westernb1ot、免疫细胞化学等方法分析PEG10在L02细胞中的表达和细胞内定位。结
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