【摘 要】
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目的 利用siRNA技术建立FANC途径修复缺陷人动脉内皮细胞模型并探讨甲醛导致的损伤.方法 采用RT-PCR和Western blot检测FANC A mRNA干扰后人动脉血管内皮细胞(HAECs)目标基因
【机 构】
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新乡医学院第一附属医院检验科,河南新乡453003;蚌埠医学院医学检验系 安徽蚌埠233030
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目的 利用siRNA技术建立FANC途径修复缺陷人动脉内皮细胞模型并探讨甲醛导致的损伤.方法 采用RT-PCR和Western blot检测FANC A mRNA干扰后人动脉血管内皮细胞(HAECs)目标基因FANC A及其蛋白表达水平;以0.72 mmol/L甲醛染毒干扰后细胞采用细胞克隆形成实验检测DNA链间交联(ICLs)损伤,以单细胞电泳方法检测DNA双链断裂(DSBs),以荧光定量法检测DNA蛋白交联(DPCs).结果 与对照组比较,干扰细胞FANC A mRNA和蛋白质表达水平分别下降95％和51％,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,甲醛染毒干扰细胞克隆形成率下降,DPCs比例升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);而DSBs无明显变化.结论 本实验成功建立了FANC途径修复缺陷人动脉内皮细胞模型.甲醛作用细胞模型产生大量链间交联损伤、DNA蛋白交联损伤及少量双链断裂损伤.
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