【摘 要】
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目的：建立小鼠成熟脂肪细胞血管基质部分（stromal vascular fraction,SVF）与小鼠肝细胞（Hepa1-6）共培养模型，研究成熟脂肪细胞对肝细胞脂质堆积以及代谢的影响。方法：从小鼠皮下脂肪分离提取原代SVF细胞，经体外分化成熟后，以Transwell小室建立成熟SVF细胞和Hepa1-6细胞间接共培养48 h体系。应用逆转录-聚合酶链反应法（RT-PCR法）检测SVF细胞PP
【机 构】
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南京医科大学罕见代谢性疾病研究重点实验室南京医科大学生物化学与分子生物学系江苏省人类功能基因组重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（91957115）； 南京医科大学科技发展基金-面上项目（2016NJMU004）；
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目的：建立小鼠成熟脂肪细胞血管基质部分（stromal vascular fraction,SVF）与小鼠肝细胞（Hepa1-6）共培养模型，研究成熟脂肪细胞对肝细胞脂质堆积以及代谢的影响。方法：从小鼠皮下脂肪分离提取原代SVF细胞，经体外分化成熟后，以Transwell小室建立成熟SVF细胞和Hepa1-6细胞间接共培养48 h体系。应用逆转录-聚合酶链反应法（RT-PCR法）检测SVF细胞PPARγ和PGC-1α等分化相关基因及Hepa1-6细胞CD36、FATP2、GPAT1等脂代谢相关基因的表达。酶法检测经共培养后的Hepa1-6细胞甘油三酯水平。结果：小鼠原代SVF细胞经诱导成熟后，出现明显较大脂滴；成熟SVF细胞中PPARγ和PGC-1α等分化标志物较未分化SVF细胞显著升高；Hepa1-6细胞甘油三酯水平明显高于未共培养组；Hepa1-6细胞GPAT1、CD36基因表达水平明显升高。结论：已成功建立成熟脂肪细胞与Hepa1-6细胞Transwell共培养模型。肝细胞与成熟脂肪细胞共培养可以诱导其脂质堆积增加，该过程可能通过上调肝细胞中CD36和GPAT1的表达水平增加脂肪酸的吸收和甘油三酯的合成通路实现。
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