胰岛素基因逆转录病毒载体在人骨髓间充质干细胞表达的实验研究

来源 :苏州大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hard_158
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目的构建携带胰岛素基因逆转录病毒载体,使其在入骨髓间充质干细胞(hMSCs)内稳定表达。方法通过RT—PCR法从人胰腺组织中提取胰岛素基因片段.并将其连接入逆转录病载体pLNCX,经包装细胞PT67的包装后.获得含外源性胰岛素基因的病毒颗粒(病毒滴度达4.2×10^6cfu/ml)并感染hMSCs,经过G418筛选后,用RT—PCR法、免疫荧光法、放射免疫法、葡萄糖刺激试验分析胰岛基因的表达情况。结果携带胰岛素基因的逆转录病毒载体构建成功,转导入hMSCs后能够稳定表达胰岛索基因,并分泌至细胞外
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