Kiaa0247与肺癌临床特征及癌细胞增殖和凋亡的相关性实验研究

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[目的]分析Kiaa0247与肺癌患者临床特征及肺癌细胞增殖和凋亡的相关性.[方法]免疫组织化学染色法检测2018年1月至2019年12月收治的肺癌患者病理组织中Kiaa0247的表达,并分析其表达与临床因素的相关性.实时荧光定量PCR检测正常肺上皮细胞BEAS-2B及不同肺癌细胞系中Kiaa0247的表达水平,选取表达量最高的细胞作为研究对象,再将Kiaa0247 si-RNA和Kiaa0247质粒转染至A549细胞,沉默或过表达细胞中的Ki-aa0247,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪测细胞周期及细胞凋亡情况,Western blot方法检测Bax及Bcl-2的蛋白表达.[结果]Kiaa0247在肺腺癌组织中表达低于正常肺组织(1.14 vs 0.69,P<0.05),鳞癌中的表达水平无明显差异(1.14 vs 1.22,P>0.05).Kiaa0247表达量与患者TNM分期及有无淋巴结转移明显相关.与BEAS-2B细胞相比,A549细胞系中Kiaa0247表达量最高(1.52 vs 0.84,P<0.01),Kiaa0247 si-RNA可降低Kiaa0247的蛋白(0.54 vs 0.23,P<0.01)及RNA表达(0.85 vs 0.43,P<0.01),转染质粒可上调Kiaa0247的蛋白(0.63 vs 0.96,P<0.01)及RNA表达(0.76 vs 1.31,P<0.01).沉默Kiaa0247在48h及72h时促进A549的增殖(0.53 vs 0.73,P<0.05)(1.21 vs 1.57,P<0.01),过表达Kiaa0247可明显抑制A549细胞增殖(0.86 vs 0.70,P<0.05)(1.51 vs 0.85,P<0.01),主要通过细胞G,/S期的转变影响增殖.沉默Kiaa0247后抑制细胞凋亡,且使Bax表达量明显降低(1.23 vs 0.78,P<0.01),Bcl-2表达明显升高(0.56 vs 1.35,P<0.01),上调Kiaa0247促进细胞凋亡,Bax表达明显升高(0.68 vs 1.32,P<0.01),Bcl-2明显降低(1.12 VS0.54,P<0.01).[结论]Kiaa0247表达可反应肺癌患者的临床分期及淋巴结转移情况,其表达量的高低明显影响肺癌细胞增殖及凋亡.
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