【摘 要】
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目的:构建稳定表达Mint2蛋白的PC12-Mint2基因工程细胞株.方法:用PCR方法将Mint2基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1A,构建真核表达质粒pcDNA3.1A-Mint2;采用脂质体Lipofectam
【机 构】
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第二军医大学基础医学部神经生物学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金,国家重点基础研究发展计划(973计划),教育部跨世纪优秀人才培养计划
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目的:构建稳定表达Mint2蛋白的PC12-Mint2基因工程细胞株.方法:用PCR方法将Mint2基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1A,构建真核表达质粒pcDNA3.1A-Mint2;采用脂质体Lipofectamine2000介导,将重组载体转染入PC12细胞,G418筛选抗性克隆,有血清培养并传代具有G418抗性的细胞,数代培养后获得工程细胞株;分别提取野生型PC12细胞和PC12-Mint2工程细胞的mRNA及细胞裂解液,RT-PCR方法检测Mint2基因是否整合入PC12细胞基因组,并用W
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