【摘 要】
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本文考察了黄芪蛋白对肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用,结合转录组学探讨黄芪蛋白抗肿瘤作用机制。黄芪干燥根部经硫酸铵沉淀,得到分子质量大小不一的黄芪蛋白(Huang Qi protein
【机 构】
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山西中医药大学基于炎性反应的重大疾病创新药物山西省重点实验室; 中国科学技术大学生命科学学院;
【基金项目】
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国家国际合作专项项目(2013DFA30700);山西省黄芪资源产业化及产业国际化协同创新中心项目(HQXTCXZX-007)
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本文考察了黄芪蛋白对肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用,结合转录组学探讨黄芪蛋白抗肿瘤作用机制。黄芪干燥根部经硫酸铵沉淀,得到分子质量大小不一的黄芪蛋白(Huang Qi protein, HQP)。通过血球计数法检测黄芪蛋白对肿瘤细胞HepG2的影响及其毒性作用;结合流式细胞术和Hoechst/propidium iodide (PI)双染测定细胞死亡情况; Western blot测定坏死标志蛋白受体相互作用的丝氨酸/苏氨酸激酶1 (RIP1);将对照组与加药组RNA进行转录组测序,对RNA测序(RNA-seq)结果进行差异表达基因分析; qRT-PCR验证候选基因mRNA相对表达量。结果表明,随着HQP浓度增加,对肝癌细胞HepG2增殖抑制作用愈加明显,当HQP质量浓度为100μg·mL-1时,细胞坏死率增加到18.78%,同时在显微镜下观察到PI单染的红色坏死细胞增多, Western blot结果显示RIP1蛋白水平增加。RNA-seq结果分析得到2.6万个相关基因受HQP调控,其中979个基因受调控较明显。KEGG分析发现部分差异表达基因与p53信号通路相关, qRT-PCR验证测序结果可靠。黄芪蛋白使HepG2细胞发生程序性坏死可能与p53信号通路有关。
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