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本研究根据金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)耐热核酸酶(nuc)基因、伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi,ST)鞭毛抗原(H1-d)基因和副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)热稳定直接溶血素(tdh)基因,分别设计了三对引物Nuc-F/Nu-R、H1-d-F/H1-d-R和Tdh-F/Tdh-R,预计PCR扩增的DNA片断分别为279 bp、202 bp和458 bp.通过对单个基因PCR和单管多重PCR扩增的特异性、敏感性分析以及对单管多重PCR扩增条件如引物浓度、退火温度和dNTP浓度等的优化,建立了快速检测金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌和副溶血弧菌的单管多重PCR方法,该方法检测的敏感性分别为:47.8pg ST的基因组DNA,22.7pg SA的基因组DNA和0.3745 pg VP的基因组DNA.模拟试验显示最低检测限度为分别为:SA 150 CFU/反应体系,ST 98 CFU/反应体系,VP 53 CFU/反应体系.表明该方法具有很好的应用价值和开发前景.