【摘 要】
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目的：探究薏苡附子败酱散对结肠癌细胞HCT116凋亡的影响，并探讨其相关的细胞凋亡机制。方法：不同浓度(0.5、1、2、4、6、8、10、12、14、16g·L-1)薏苡附子败酱散干预结肠癌细胞24、48、72h，细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测细胞体外增殖的影响；设空白组、卡培他滨组(1.8 g·L-1)和不同浓度薏苡附子败酱散(6、10、14g·L-1)，分别处理48h后，采用流式细胞技
【基金项目】
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四川省科技计划项目（2019YFS0163）； 四川大学-泸州市人民政府联合课题（NO.2020CDLZ-18）； 西南医科大学附属中医医院中西医结合防治消化系统疾病创新团队（2022-CXTD-01）；
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目的：探究薏苡附子败酱散对结肠癌细胞HCT116凋亡的影响，并探讨其相关的细胞凋亡机制。方法：不同浓度(0.5、1、2、4、6、8、10、12、14、16g·L-1)薏苡附子败酱散干预结肠癌细胞24、48、72h，细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测细胞体外增殖的影响；设空白组、卡培他滨组(1.8 g·L-1)和不同浓度薏苡附子败酱散(6、10、14g·L-1)，分别处理48h后，采用流式细胞技术检测细胞凋亡率，Hochest 33342荧光染色观察细胞凋亡形态，线粒体红色荧光探针（Mito-Tracker Red CMXRos）分析线粒体膜电位（MMP）变化，蛋白质印迹法（Western Blot）检测线粒体凋亡途径相关蛋白B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、细胞色素C（cyt-C）、半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase-9、Caspase-3）、活化的半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3）的表达水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、cyt-C、Caspase-9和Caspase-3 mRNA的表达。结果：与空白组比较，不同浓度薏苡附子败酱散在体外对结肠癌HCT116细胞增殖有明显抑制作用，呈浓度依赖关系（P＜0.05）；与空白组比较，薏苡附子败酱散10g·L-1和14g·L-1组及卡培他滨组对结肠癌细胞具有明显的凋亡作用（P＜0.05）；与空白组比较，不同浓度的薏苡附子败酱散组(6、10、14g·L-1)和卡培他滨组结肠癌细胞数目均减少，且细胞形态发生了明显的变化，细胞呈现较强深蓝色荧光、细胞核浓集、缩小、碎裂等细胞凋亡现象；随着薏苡附子败酱散浓度的增高，蓝色荧光强度均显著增强（P＜0.05）；与空白组比较，不同浓度的薏苡附子败酱散组(6、10、14g·L-1)和卡培他滨组MMP均明显降低，呈浓度依赖关系（P＜0.05）；与空白组比较，不同浓度的薏苡附子败酱散和卡培他滨组Bcl-2蛋白和Bcl-2 mRNA表达明显下降，Bax、cyt-C、Caspase-9、Cleaved Caspase-9、Caspase-3、Cleaved Caspase-3蛋白和Bax、cyt-C、Caspase-9、Caspase-3 mRNA表达明显升高（P＜0.05）。结论：薏苡附子败酱散可能通过线粒体凋亡途径诱导结肠癌细胞HCT116发生凋亡。
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