【摘 要】
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目的:探讨环黄芪醇对H2O2处理的HT22细胞氧化应激损伤的保护作用,并对其潜在机制进行研究.方法:首先采用MTT法检测经不同浓度环黄芪醇处理的HT22细胞活性差异,对环黄芪醇的有效浓度进行筛选.将细胞分为5组,其中空白组和H2O2组不加入环黄芪醇,其余3组根据筛选结果分别加入不同浓度的环黄芪醇(50、75、100μmol/L)培养24 h.然后除空白组外,其余4组均加入H2O2作用4 h.采用DCFH-DA活性氧探针检测各组细胞中ROS的生成水平;免疫荧光染色检测各组细胞中Nrf2的入核情况;蛋白免疫印
【机 构】
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南京中医药大学附属医院,江苏 南京 210029
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目的:探讨环黄芪醇对H2O2处理的HT22细胞氧化应激损伤的保护作用,并对其潜在机制进行研究.方法:首先采用MTT法检测经不同浓度环黄芪醇处理的HT22细胞活性差异,对环黄芪醇的有效浓度进行筛选.将细胞分为5组,其中空白组和H2O2组不加入环黄芪醇,其余3组根据筛选结果分别加入不同浓度的环黄芪醇(50、75、100μmol/L)培养24 h.然后除空白组外,其余4组均加入H2O2作用4 h.采用DCFH-DA活性氧探针检测各组细胞中ROS的生成水平;免疫荧光染色检测各组细胞中Nrf2的入核情况;蛋白免疫印迹法检测各组细胞凋亡相关蛋白的表达情况.结果:本实验中,使用环黄芪醇作用于细胞的有效浓度分别为50、75、100μmol/L.随着环黄芪醇浓度的增加,环黄芪醇的保护作用也随之增强.环黄芪醇可抑制细胞中ROS的产生,促进Nrf2的入核,降低凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax的表达,增加Cleaved Caspase-3、Bcl-2的表达,减少细胞色素C的释放,并表现出浓度依赖性.结论:环黄芪醇对H2O2导致的HT22细胞的氧化应激损伤呈现出保护作用,这种保护作用可能是通过激活Nrf2通路来实现的.
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