【摘 要】
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目的 探讨参仙升脉口服液能否通过抑制病态窦房结综合征小鼠窦房结细胞钙超载而减轻窦房结组织纤维化,进而改善窦房结功能,并探究其机制是否与CaMKII/CREB通路相关.方法 30只
【机 构】
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辽宁中医药大学第一临床学院,辽宁沈阳110032;中国医科大学实验动物部,辽宁沈阳110001;辽宁中医药大学附属医院心内二科,辽宁沈阳110031
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目的 探讨参仙升脉口服液能否通过抑制病态窦房结综合征小鼠窦房结细胞钙超载而减轻窦房结组织纤维化,进而改善窦房结功能,并探究其机制是否与CaMKII/CREB通路相关.方法 30只SPF级C57B6小鼠随机分为三组:假手术组(SHAM组)、病态窦房结综合征组(SSS组)、参仙升脉口服液组(SXSM组),每组10只.于各组小鼠颈部皮下植入微量渗透泵,其中SSS组及SXSM组持续泵入血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导慢性窦房结损伤以模拟病态窦房结综合征(SSS),SHAM组泵入生理盐水.SXSM组小鼠于建模次日给予参仙升脉口服液15 mL/(kg·d)灌胃处理,其余两组每日灌胃等量生理盐水;各组小鼠分别于建模前(即第0天),建模后第7、14、21、28天监测心率变化;28 d后处死小鼠,使用Masson染色法观察小鼠窦房结区域组织纤维化程度;激光共聚焦显微镜观察小鼠窦房结细胞内Ca2+含量变化;Western-blot法检测CaMKII/CREB通路相关蛋白及纤维化相关因子Ⅰ型胶原蛋白α1链(COL1A1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、L型电压门控钙离子通道(Cav 1.2)及T型电压门控钙离子通道(Cav3.1)蛋白的表达;RT-PCR法检测各组小鼠窦房结组织Cav1.2、Cav3.1 mRNA的水平.结果 与SSS组相比,SXSM组小鼠心率显著提升,窦房结区域纤维化程度显著改善,窦房结细胞内病理性钙离子浓度明显降低,且窦房结区域Cav1.2、Cav3.1mRNA及COL1A1、MMP-2、Cav1.2、Cav3.1、CaMKII/CREB通路相关蛋白表达量显著下降.结论 参仙升脉口服液能显著抑制AngⅡ诱导的窦房结纤维化,减少窦房结胞内钙超载,提升心率,其机制可能与其能抑制CaMKII/CREB通路有关.
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