【摘 要】
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目的探讨人胆囊癌细胞系GBC-SD耐药性产生的机制,建立先天性耐药的人胆囊癌细胞模型.方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测GBC-SD细胞多药耐药相关蛋白(MDR1)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药蛋白(LRP)基因扩增;免疫细胞化学染色检测该细胞系P-糖蛋白(P-gp)、MRP和LRP蛋白表达;流式细胞术测定P-gp、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱ(TOPO
【机 构】
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430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心,山东大学齐鲁医院普外科,
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目的探讨人胆囊癌细胞系GBC-SD耐药性产生的机制,建立先天性耐药的人胆囊癌细胞模型.方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测GBC-SD细胞多药耐药相关蛋白(MDR1)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药蛋白(LRP)基因扩增;免疫细胞化学染色检测该细胞系P-糖蛋白(P-gp)、MRP和LRP蛋白表达;流式细胞术测定P-gp、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)表达水平;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测该细胞对8种抗癌药物的敏感性.结果人胆囊癌GBC-SD细胞中MDR1、MRP和LRP基因呈阳性扩增,P-gp、MRP、LRP蛋白表达阳性;GST-π和TOPOⅡ的表达水平与对照组细胞差异无显著性.四唑盐比色结果显示,GBC-SD细胞对8种抗肿瘤药物均有程度不同的耐受性,耐药倍数从5.3倍到42倍不等.结论人胆囊癌细胞系GBC-SD是一株先天性耐药的恶性肿瘤细胞系,其耐药性的产生与MDR1、MRP、LRP基因扩增有关.
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