【摘 要】
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单克隆抗体的糖链对其功能活性具有重要的影响,因此开展糖链分析技术的研究具有十分重要的意义。采用亲水作用色谱荧光检测方法建立了N端糖链的定量分析技术。对于常见的3种N端糖链G0F、G1F、G2F,其线性范围分别为7.5×10-11～1.5×10-8、4.5×10-11～9.0×10-9以及7.5×10-11～4.5×10-9 mol/L;检测下限分别为2.8×10-11、2.5×10-11、2.6×
【机 构】
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华东理工大学食品科学与工程系生物反应器工程国家重点实验室
【基金项目】
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上海市科委科研计划项目（18142202600）；
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单克隆抗体的糖链对其功能活性具有重要的影响,因此开展糖链分析技术的研究具有十分重要的意义。采用亲水作用色谱荧光检测方法建立了N端糖链的定量分析技术。对于常见的3种N端糖链G0F、G1F、G2F,其线性范围分别为7.5×10-11～1.5×10-8、4.5×10-11～9.0×10-9以及7.5×10-11～4.5×10-9 mol/L;检测下限分别为2.8×10-11、2.5×10-11、2.6×10-11 mol/L;保留时间和峰面积的RSD值均小于3%,方法的回收率均大于95%。采用酶切N端糖链和2-氨基苯甲酰胺标记法可以实现西妥昔单抗的这3种N端糖链的含量分析,分别为86.0、85.1、16.6μg/g。除了上述3种糖链,还利用超高效液相色谱-电喷雾离子化串联质谱联用技术进一步对西妥昔单抗其他6种相对丰度较高的N端糖链的种类进行解析。这些研究不仅可以应用于单抗药物的N端糖链的质控分析,而且对其糖链种类进行解析以实现更多的生物学研究。
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