【摘 要】
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目的克隆人热休克蛋白72(HSP72)基因,原核表达并纯化蛋白产物,以探讨其生物学功能. 方法从热休克的人肝癌细胞株SMMC-7721中,用RT-PCR方法扩增得到HSP72基因并克隆到原核表达
【机 构】
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第四军医大学西京医院急诊科,第四军医大学基础部病理学教研室
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目的克隆人热休克蛋白72(HSP72)基因,原核表达并纯化蛋白产物,以探讨其生物学功能. 方法从热休克的人肝癌细胞株SMMC-7721中,用RT-PCR方法扩增得到HSP72基因并克隆到原核表达载体pQE-30中,在大肠杆菌JM109中用IPTG诱导下表达的蛋白经FPLC梯度洗脱和Sephacryl S200凝胶过滤纯化,经SDS-PAGE电泳后转印到NC膜上,用anti-HSP72单抗作探针,进行Western blot鉴定. 结果克隆的基因序列分析结果与有关报道一致,所构建的pQE-30HSP72载体
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