【摘 要】
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目的 观察绝经后骨质疏松发生后脂肪来源干细胞(opASCs)成骨分化.方法 成年SD大鼠切除双侧卵巢,12周后建立绝经后骨质疏松动物模型(ovx组),同时设立假手术组动物模型(sham组)
【机 构】
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烟台山医院创伤骨科, 山东烟台,264001解放军107医院口腔科;青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院创伤骨科;
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目的 观察绝经后骨质疏松发生后脂肪来源干细胞(opASCs)成骨分化.方法 成年SD大鼠切除双侧卵巢,12周后建立绝经后骨质疏松动物模型(ovx组),同时设立假手术组动物模型(sham组)作为对照.取两组大鼠皮下脂肪组织分离获得脂肪来源干细胞(ovx组:opASCs;sham组:ASCs),进行体外成骨诱导培养.对其碱性磷酸酶(1周后)及细胞外基质矿化(2周后)程度进行定性及定量检测.同时通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察成骨特异性基因包括Ⅰ型胶原(COL)、骨钙蛋白(OC)、骨唾液蛋白(BSP)的相对表达水平.结果 双侧卵巢去势后12周,ovx组股骨骨密度系统性下降[骨密度(BMD):(0.152±0.005) g/cm2],显著低于sham组(P＜0.05),提示骨质疏松动物模型成功建立.opASCs成骨诱导7d后碱性磷酸酶呈高效表达(偶氮耦联法胞质紫红色),14 d后von Kossa染色呈黑色,提示胞外基质矿化.与ASCs比较,碱性磷酸酶[7 d:(0.156±0.021) nmol/(μg·min);14 d:(0.506 ±0.039) nmol/(μg· min)]及胞外基质矿化(7 d:23.525±3.325;14 d:61.456±2.634)差异无统计学意义(P＞0.05).而且opASCs展现出与ASCs类似的COL(1 d:0.014±0.001;7 d:0.225 ±0.015;14 d:0.387±0.004)、OC(1 d:0.015 ±0.002;7 d:0.276±0.009;14 d:0.542 ±0.014)、BSP(l d:0.018±0.001;7 d:0.365±0.012;14 d:0.645±0.014)表达水平(P＞0.05).结论 来源于绝经后骨质疏松动物模型的opASCs具有与健康动物来源ASCs类似的成骨分化潜能.
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