HPLC-荧光衍生法同时测定人血浆中维生素K1和K2的浓度

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目的建立高效液相色谱荧光检测法,测定人血浆中内源性维生素K同系物的浓度。方法应用氯化亚锡使维生素K同系物发生荧光衍生,盐析液液萃取后采用色谱柱AQ-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相甲醇-水(98∶2,V/V),流速1m L·min-1,激发波长248 nm,发射波长418 nm,柱温30℃进行分析。结果内源性维生素K1(VK1)的标准曲线方程为Ya=2.944ρa+0.023(r=0.999 8),定量范围1.00050.036 ng·m L-1,内源性维生素K2(VK2)的标准曲线方程为Yb=1.195ρb+2.653(r=0.999 7),定量范围5.006100.124 ng·m L-1。VK1和VK2的精密度、稳定性、重复性及冻融试验的相对标准偏差(RSD)均小于10%,符合生物样品的测定需要。结论该法操作简便、灵敏、准确,适用于的内源性维生素K同系物测定。
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