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采集河南自然发病的烟草,通过摩擦接种至实验室烟草后直接提取总RNA,利用反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)扩增获得了烟草马铃薯Y病毒外壳蛋白(PVY—HN CP)基因;经NdeⅠ和SalⅠ双酶切处理的PCR产物,连接克隆至大肠杆菌表达载体pET28a(+),构建了重组质粒pPVYCP,所获得的重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实正确插入了PVY—HN CP基因的全长ORF.序列分析表明,PVY—HN CP基因由804个核苷酸组成,编码267个氨基酸残基;重组的pPVYCP表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3