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【摘要】 目的 探讨哮喘儿童缓解期外周血T细胞亚群的意义。方法 采用单克隆抗体间接免疫荧光法检测67例缓解期哮喘儿童(哮喘组)及29例健康儿童(对照组)外周血T细胞亚群的水平。结果 缓解期哮喘儿童与对照组比较,CD3+无明显差异(P>0.05),CD4+,CD4+/CD8+明显低于对照组(p分别<0.01,0.05),CD8+明显高于对照组(P<0.05)。结论 哮喘儿童缓解期仍存在T细胞亚群功能紊乱,T细胞亚群功能紊乱在儿童支气管哮喘的发病中发挥一定的作用。
【关键词】
儿童;哮喘;缓解期;T细胞亚群
The research of significance Tlymphocyte subsets in peripheral blood in the recovery period of childhood with asthma
FENG Jinhuan,QIN Pu,ZHANG Junying.Department of Pediatrics,Hiser Hospital Affiliated to Medical School of Qingdao University,Qingdao 266033,China
【Abstract】 Objective To investigate significance of T lymphocyte subsets in peripheral blood in the recovery period of children with asthma.Methods To measure CD3+T cell,CD4+T cell,CD8+T cell and CD4+/CD8+ratio by indirect immunofluorescence andcompare the results.Results The levels of CD4+T cell,CD4+/CD8+ratio in the children with asthma in the recovery period were significantly lower than those in normal subjects(P<0.01,0.05);CD8+was also significantly higher than that in normal subjects(P<0.05).There were no significant differences in the level of CD3+between the children with asthma in the recovery period and healthy subjects(P>0.05).Conclusion There are imbalances of T cell sebsets in the children with asthma in the recovery period,The imbalances of T cell sebsets mayplay an important role in asthma chronic airway inflammation.
【Key words】
Children; Asthma; Recovery period; T lyphocytes sebsets
DOI:10.3760/cma.j.issn 16738799.2010.01.67
作者单位:266033青岛大学医学院附属海慈医院儿科
研究表明,支氣管哮喘是一种以气道高反应性和气道慢性炎性反应为特征的变态反应性疾病,有多种炎性细胞参与了炎症过程[1],T淋巴细胞在发病过程中发挥重要作用。我们检测了支气管哮喘儿童缓解期的外周血T细胞亚群,现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 随机选取2006年11月至2007年11月在我院儿童哮喘门诊就诊的缓解期哮喘儿童67例(哮喘组),男35例,女32例,平均年龄7岁,均符合全国儿童哮喘协作组制定的哮喘缓解期诊断标准[2];对照组29例随机选取儿童保健门诊查体的健康儿童,男16例,女13例,平均年龄6岁,两组儿童在性别、年龄构成上无显著差异,具有可比性。就诊前3个月均未接受免疫调节剂及糖皮质激素的治疗。
1.2 方法 对照组及哮喘组均采集空腹静脉血(无菌肝素抗凝)3 ml,采用单克隆抗体间接免疫荧光法检测T细胞亚群,试剂购自武汉生物技术研究所,操作严格按说明书进行。
1.3 统计学处理 结果呈正态分布,用均数±标准差表示(x±s)。采用SPSS11.0统计软件进行处理,组间比较采用t检验。
2 结果
缓解期哮喘儿童与对照组比较,CD3+无明显差异(P>0.05),CD4+,CD4+/CD8+明显低于对照组(p分别<0.01,0.05),CD8+明显高于对照组(P<0.05),见表1。
表1
儿童哮喘组与对照组T细胞亚群的检测结果(x±s)
组别例数CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+
哮喘组6758.40±3.0933.3±1.94*34.36±3.31**0.96±0.24**
对照组2959.12±3.1642.57±4.0530.12±4.231.28±0.18
t值0.9411.81**3.54**2.18*
注:与对照组比较,*P<0.01,**P<0.05
3 讨论
T淋巴细胞按细胞表面抗原分为CD4+细胞和CD8+细胞等,按免疫功能分为辅助性T细胞(Th)、抑制性T细胞(Ts)和细胞毒T细胞(Tc)亚群。CD3+是成熟T细胞的表面标志,CD4+分子表达在Th细胞表面,CD8+分子多表达在Ts和Tc细胞。Th/Ts在维持正常机体免疫反应过程中发挥重要作用。
T细胞亚群在哮喘患者如何改变还有争议。但哮喘患者均存在T细胞亚群的失衡。部分研究结果证实,哮喘儿童发作期CD3+、CD4+、CD4/CD8比值明显高于正常对照组,CD8+正常[3,4],也有部分资料显示[5],哮喘儿童治疗前后血CD3+、CD4+、CD8+明显低于正常对照组,而CD4+/CD8+比值则明显高于正常对照组。本组资料显示缓解期哮喘儿童CD4+、CD4+/CD8+均显著低于对照组,CD8+T细胞明显高于对照组。而CD3+细胞无明显变化,表明T细胞亚群失衡与哮喘发病有密切关系,缓解期哮喘儿童仍存在这种免疫紊乱,从该角度表明哮喘在缓解期继续治疗的必要性。有学者研究表明[6],哮喘患儿适量吸入糖皮质激素3个月后病情稳定,Th1/Th2及CD4+、CD8+趋于平衡,因此应认真执行哮喘防治方略,尤其是缓解期的长期规范治疗。本组资料与文献报道不尽相同,原因可能为①T细胞亚群的测定方法不同,敏感度与准确度也不同,选取标本的差异等导致结果不尽相同;②CD8+T细胞在杀伤靶细胞后迅速凋亡,发病时在外周血中含量不稳定;③CD4+T细胞在活化、增殖和分化过程中受到多种因素的影响[7,8]。
总之,哮喘儿童缓解期仍存在T淋巴细胞亚群的失衡,在缓解期哮喘的治疗中除了局部吸入激素减轻气道的慢性炎症外,尚需应用免疫调节剂以改善哮喘儿童的免疫功能,如细胞免疫功能。
参考文献
[1] 赵顺英.哮喘发病机制研究进展.实用儿科临床杂志,2003,18(10):768771.
[2] 全国儿童哮喘防治协作组.儿童哮喘防治常规(试行).中华儿科杂志,1998,36(12):747751.
[3] 安肃英,孙宗芝,李根山.哮喘儿童血免疫球蛋白E、T细胞亚群与细胞因子动态观察及临床意义.实用儿科临床杂志,2004,19(02):117.
[4] 冯忠伟,胡忠昌,邢应如,等.哮喘患儿外周血T细胞亚群与Th1/Th2型细胞因子的监测.中国煤炭工业医药杂志,2005,8(02):152.
[5] 刘力戈,侯安存,方惠秋,等.支气管哮喘患儿血T辅助淋巴细胞的变化.实用儿科临床杂志,2006,21(04):217.
[6] 赵启华,贾云义,潘贻珍,等.支气管哮喘患儿吸入糖皮质激素治疗前后细胞因子及免疫功能变化.实用儿科临床杂志,2003,18(10):784.
[7] SHI HZ,SUN JJ,PAN HL,et al.Alterations of Flymphocyte subsets Solubl IL2 recepor,and IgE in peripheral blood of children with acute asthma attacks J Allegy Clin Immunol,1999,103(3pt 1):388394.
[8] LEES Y,KIM SJ,KWON SS,et al.Distribution and cytokine production of CD4 and CD8 T1ymphocyte subsets in patients with acute asthma attacks,Ann Alleryy Asthma Immunol,2001,86(6):659.
【关键词】
儿童;哮喘;缓解期;T细胞亚群
The research of significance Tlymphocyte subsets in peripheral blood in the recovery period of childhood with asthma
FENG Jinhuan,QIN Pu,ZHANG Junying.Department of Pediatrics,Hiser Hospital Affiliated to Medical School of Qingdao University,Qingdao 266033,China
【Abstract】 Objective To investigate significance of T lymphocyte subsets in peripheral blood in the recovery period of children with asthma.Methods To measure CD3+T cell,CD4+T cell,CD8+T cell and CD4+/CD8+ratio by indirect immunofluorescence andcompare the results.Results The levels of CD4+T cell,CD4+/CD8+ratio in the children with asthma in the recovery period were significantly lower than those in normal subjects(P<0.01,0.05);CD8+was also significantly higher than that in normal subjects(P<0.05).There were no significant differences in the level of CD3+between the children with asthma in the recovery period and healthy subjects(P>0.05).Conclusion There are imbalances of T cell sebsets in the children with asthma in the recovery period,The imbalances of T cell sebsets mayplay an important role in asthma chronic airway inflammation.
【Key words】
Children; Asthma; Recovery period; T lyphocytes sebsets
DOI:10.3760/cma.j.issn 16738799.2010.01.67
作者单位:266033青岛大学医学院附属海慈医院儿科
研究表明,支氣管哮喘是一种以气道高反应性和气道慢性炎性反应为特征的变态反应性疾病,有多种炎性细胞参与了炎症过程[1],T淋巴细胞在发病过程中发挥重要作用。我们检测了支气管哮喘儿童缓解期的外周血T细胞亚群,现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 随机选取2006年11月至2007年11月在我院儿童哮喘门诊就诊的缓解期哮喘儿童67例(哮喘组),男35例,女32例,平均年龄7岁,均符合全国儿童哮喘协作组制定的哮喘缓解期诊断标准[2];对照组29例随机选取儿童保健门诊查体的健康儿童,男16例,女13例,平均年龄6岁,两组儿童在性别、年龄构成上无显著差异,具有可比性。就诊前3个月均未接受免疫调节剂及糖皮质激素的治疗。
1.2 方法 对照组及哮喘组均采集空腹静脉血(无菌肝素抗凝)3 ml,采用单克隆抗体间接免疫荧光法检测T细胞亚群,试剂购自武汉生物技术研究所,操作严格按说明书进行。
1.3 统计学处理 结果呈正态分布,用均数±标准差表示(x±s)。采用SPSS11.0统计软件进行处理,组间比较采用t检验。
2 结果
缓解期哮喘儿童与对照组比较,CD3+无明显差异(P>0.05),CD4+,CD4+/CD8+明显低于对照组(p分别<0.01,0.05),CD8+明显高于对照组(P<0.05),见表1。
表1
儿童哮喘组与对照组T细胞亚群的检测结果(x±s)
组别例数CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+
哮喘组6758.40±3.0933.3±1.94*34.36±3.31**0.96±0.24**
对照组2959.12±3.1642.57±4.0530.12±4.231.28±0.18
t值0.9411.81**3.54**2.18*
注:与对照组比较,*P<0.01,**P<0.05
3 讨论
T淋巴细胞按细胞表面抗原分为CD4+细胞和CD8+细胞等,按免疫功能分为辅助性T细胞(Th)、抑制性T细胞(Ts)和细胞毒T细胞(Tc)亚群。CD3+是成熟T细胞的表面标志,CD4+分子表达在Th细胞表面,CD8+分子多表达在Ts和Tc细胞。Th/Ts在维持正常机体免疫反应过程中发挥重要作用。
T细胞亚群在哮喘患者如何改变还有争议。但哮喘患者均存在T细胞亚群的失衡。部分研究结果证实,哮喘儿童发作期CD3+、CD4+、CD4/CD8比值明显高于正常对照组,CD8+正常[3,4],也有部分资料显示[5],哮喘儿童治疗前后血CD3+、CD4+、CD8+明显低于正常对照组,而CD4+/CD8+比值则明显高于正常对照组。本组资料显示缓解期哮喘儿童CD4+、CD4+/CD8+均显著低于对照组,CD8+T细胞明显高于对照组。而CD3+细胞无明显变化,表明T细胞亚群失衡与哮喘发病有密切关系,缓解期哮喘儿童仍存在这种免疫紊乱,从该角度表明哮喘在缓解期继续治疗的必要性。有学者研究表明[6],哮喘患儿适量吸入糖皮质激素3个月后病情稳定,Th1/Th2及CD4+、CD8+趋于平衡,因此应认真执行哮喘防治方略,尤其是缓解期的长期规范治疗。本组资料与文献报道不尽相同,原因可能为①T细胞亚群的测定方法不同,敏感度与准确度也不同,选取标本的差异等导致结果不尽相同;②CD8+T细胞在杀伤靶细胞后迅速凋亡,发病时在外周血中含量不稳定;③CD4+T细胞在活化、增殖和分化过程中受到多种因素的影响[7,8]。
总之,哮喘儿童缓解期仍存在T淋巴细胞亚群的失衡,在缓解期哮喘的治疗中除了局部吸入激素减轻气道的慢性炎症外,尚需应用免疫调节剂以改善哮喘儿童的免疫功能,如细胞免疫功能。
参考文献
[1] 赵顺英.哮喘发病机制研究进展.实用儿科临床杂志,2003,18(10):768771.
[2] 全国儿童哮喘防治协作组.儿童哮喘防治常规(试行).中华儿科杂志,1998,36(12):747751.
[3] 安肃英,孙宗芝,李根山.哮喘儿童血免疫球蛋白E、T细胞亚群与细胞因子动态观察及临床意义.实用儿科临床杂志,2004,19(02):117.
[4] 冯忠伟,胡忠昌,邢应如,等.哮喘患儿外周血T细胞亚群与Th1/Th2型细胞因子的监测.中国煤炭工业医药杂志,2005,8(02):152.
[5] 刘力戈,侯安存,方惠秋,等.支气管哮喘患儿血T辅助淋巴细胞的变化.实用儿科临床杂志,2006,21(04):217.
[6] 赵启华,贾云义,潘贻珍,等.支气管哮喘患儿吸入糖皮质激素治疗前后细胞因子及免疫功能变化.实用儿科临床杂志,2003,18(10):784.
[7] SHI HZ,SUN JJ,PAN HL,et al.Alterations of Flymphocyte subsets Solubl IL2 recepor,and IgE in peripheral blood of children with acute asthma attacks J Allegy Clin Immunol,1999,103(3pt 1):388394.
[8] LEES Y,KIM SJ,KWON SS,et al.Distribution and cytokine production of CD4 and CD8 T1ymphocyte subsets in patients with acute asthma attacks,Ann Alleryy Asthma Immunol,2001,86(6):659.