【摘 要】
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目的:基于定量检测动物源性食品中四环素类抗生素的残留量,开发研制四环素类抗生素竞争酶联免疫(ELISA)检测试剂盒。方法:采用杂交瘤技术,筛选并克隆稳定分泌抗四环素(CEL)的
【机 构】
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中国农业科学院蜜蜂研究所,北京华安麦科生物技术有限公司
【基金项目】
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科技部科研院所技术开发专项(2009EG134274);国家现代蜜蜂产业技术体系项目(NYCYTI-43-KXJ17);农业部“948”项目(2006-G19)
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目的:基于定量检测动物源性食品中四环素类抗生素的残留量,开发研制四环素类抗生素竞争酶联免疫(ELISA)检测试剂盒。方法:采用杂交瘤技术,筛选并克隆稳定分泌抗四环素(CEL)的杂交瘤细胞株,利用免疫BALB/c小白鼠制备抗四环素单克隆抗体。结果:logit/log拟合标准曲线为y=-2.3x+2.79,相关系数r=0.9971,线性检测范围为0.05～4.05ng/mL,半数抑制剂量(IC50)为0.293ng/mL,灵敏度为0.05ng/mL,检测限为3～5ng/mL;组织、牛奶、蜂蜜的添加回收率分别为(90±10)%、(85±10)%、(90±10)%;平均批内和批间变异系数均小于15%;四环素与金霉素等同类抗生素的交叉反应率大于60%,与其他类抗生素无交叉反应;此试剂盒在4℃可保存180d以上。结论:建立的试剂盒是符合技术指标的要求,可用于动物源性食品中四环素类抗生素残留的定量检测。
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