【摘 要】
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目的 筛选获得急性单核细胞白血病相关抗原22(MLAA-22)最佳RNA干扰序列,为后期MLAA-22功能研究奠定基础.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)克隆MLAA-22蛋白质编码区序列(C
【机 构】
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710004,西安交通大学医学院第二附属医院血液内科
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目的 筛选获得急性单核细胞白血病相关抗原22(MLAA-22)最佳RNA干扰序列,为后期MLAA-22功能研究奠定基础.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)克隆MLAA-22蛋白质编码区序列(CDS),将测序正确的MLAA-22 CDS插入pEGFP-N1-3FLAG载体,构建真核pEGFP-N1-3FLAG表达载体,同时构建4个MLAA-22靶向RNA干扰载体,共转染293T细胞后通过细胞荧光强度分析及蛋白印迹法筛选最佳MLAA-22 RNA干扰序列.结果成功构建了MLAA-22真核pEGFP-N1-3FLAG表达载体,同时构建了4个RNA干扰载体,共转染293T细胞后筛选获得KD2为最佳干扰序列.结论 KD2是靶向MLAA-22抗原基因的最佳RNA干扰序列.
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