【摘 要】
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背景:寻找一种既能适合细胞生长又避免添加血清的培养基迫在眉睫,无血清培养应运而生。目的:探索一种适用于C3A细胞生长的无血清培养基,为肝细胞用于临床治疗以及生物人工肝
【机 构】
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南方医科大学珠江医院肝胆二科,佛山市禅城区中心医院肝胆外科
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背景:寻找一种既能适合细胞生长又避免添加血清的培养基迫在眉睫,无血清培养应运而生。目的:探索一种适用于C3A细胞生长的无血清培养基,为肝细胞用于临床治疗以及生物人工肝走入临床奠定基础。方法:分别用无血清培养基、完全培养基和基础培养基培养C3A细胞,观察细胞的生长状态,绘制细胞生长曲线和活力曲线,全自动生化分析仪测定上清中谷丙转氨酶漏出量、尿素含量,放射免疫分析法检测白蛋白分泌量,实时荧光定量PCR检测基因水平的变化情况。结果与结论:3种培养基培养的细胞生长良好,无血清培养基组与完全培养基组细胞密度在培养周期内,除第7天以外差异无显著性意义(P>0.05)。培养第4~7天,其他两组明显高于基础培养基组(P<0.05);无血清培养基尿素合成水平>完全培养基>基础培养基(P<0.05)。Real-time qPCR显示,无血清培养基组相对于完全培养基组仅CK18、CK19和HNF4α基因表达量下降(P<0.05)。说明实验研制了一种适合于肝细胞(C3A)生长的无血清培养基,与传统血清培养能达到同样的效果。
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