人端粒酶逆转录酶与热休克蛋白70融合表达载体的构建及原核表达

来源 :南京医科大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sweetyjiaxin
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目的:构建热休克蛋白70(HSP70)与人端粒酶逆转录酶融合表达载体,在大肠杆菌进行表达。方法:利用PCR方法扩增hTERT基因片段(532aa~637aa),双酶切后插入原核表达载体pET32a的NcoⅠ和EcoRⅠ位点之间,形成pET32a-hTERT质粒。通过PCR方法扩增人HSP70全长cDNA,双酶切后插入pET32a-hTERT的EcoRⅠ和HindⅢ位点之间,构建hTERT与HSP70的N端融合基因原核表达质粒pET32a-hTERT-HSP70。含有该质粒的大肠杆菌BL21经异丙醛-B-D
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