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【摘 要】 目的：了解临床不同标本分离的大肠埃希菌的耐药特点及差异，以合理使用抗菌药物。方法：喀什地区第二人民医院？2015年01月～2016年1月临床送检的中段尿、痰、血液，其他无菌标本经常规培养，采用法国生物梅里埃VITEK2全自动细菌鉴定药敏分析仪及配套的鉴定及药敏试剂条进行大肠埃希菌的鉴定及药敏试验，比较不同标本所检出大肠埃希菌对抗菌药物的药物敏感性。结果：共检出大肠埃希菌1152株，尿液标本检出率最高达到60.8%，其中对阿莫西林、氨苄西林耐药率大于70%；对头孢吡肟、环丙沙星、頭孢唑林，头孢曲松，氨曲南，复方新诺明，庆大霉素的耐药率在40%以上；对妥布霉素、阿莫西林/克拉维酸、头孢西丁、呋喃妥因，哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星的耐药性较低。
【关键词】 大肠埃希菌 耐药性 抗菌药物
大肠埃希菌为革兰阴性杆菌，常栖居在人和动物的肠道内，亦可存在于自然环境中。大肠埃希菌是人类主要的条件致病菌，通常情况下不致病，当移位于肠外组织及器官时，则引起肠外感染。近年来随着广谱抗菌药物广泛应用，特别是第三代头孢菌素等不合理使用，产ESBLs的菌株日渐增多。且对第三代头孢菌素等呈现多重耐药倾向，给临床治疗带来很大的困难，应引起临床医师的高度重视。为了解喀什二院临床分离的大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药性及不同标本中大肠埃希菌的耐药性差异，为临床提供诊断和用药的依据，现对我院2015年1月～2016年1月临床送检的血液、尿液、痰和其他标本进行鉴定和耐药性监测，报告如下。
1 材料和方法
1.1 菌株来源
1152株大肠埃希菌均来自喀什地区第二人民医院检验2015年1月～2016年1月临床各科所送的血液、尿液、痰和其他（脓液、胆汁、胸腹水、各种穿刺液及分泌物）标本分离于同一病人不同时间的细菌，如果鉴定和药敏结果相同则只按一株计算。
1.2 仪器及材料
法国生物梅里埃公司VITEK2全自动细菌分析系统， M-H琼脂平板、哥伦比亚血琼脂平板、巧克力琼脂平板为梅里埃公司产品，药敏纸片为英国Oxoid公司产品，质控菌株大肠埃希菌ATCC25922.
1.3 方法
菌株的分离与鉴定标本的分离培养严格按照《全国临床检验操作规程》要求进行。血培养把装有患者血液标本的快速血培养瓶放入快速血培养仪内，阳性报警取出转种哥伦比亚血琼脂平板和伊红美蓝；尿培养取10uL尿液标本划线接种于哥伦比亚血琼脂平板和伊红美蓝上；痰培养将患者痰液分别接种于哥伦比亚血琼脂平板，伊红美蓝和嗜血巧克力平板；其他标本则根据项目选择合理的培养基放置35℃二氧化碳培养箱培养24h。对平板上灰白、光滑湿润、圆凸大的可疑菌落进行革兰氏染色，镜下发现中等大小阴性杆菌，采用法国生物梅里埃公司VITEK2全自动鉴定系统及配套的药敏条进行鉴定。超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的筛选和确证试验严格按照美国临床实验室国家标准化委员会（NCCLS）2013 年版制定的规则及标准进行。
1.4 统计方法
用SPSS 20.0 统计软件进行统计学分析血液、尿液、痰液、其他标本四种标本来源的大肠埃希菌组间耐药率比较采用 Friedman 检验，以 P< 0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 菌株总数及分布
我院2015年1月～2O16年1月临床各科共分离大肠埃希菌1152株（28.8%）按标本来源分为尿液标本701株（60.8%）、血液标本 90株（7.8%）、痰标本 90株（7.8%）、痰标本为7.8%、其它标本（包括脓液、胆汁、胸腹水、各种穿刺液及分泌物） 为273株（23.7%）。多重耐药菌大肠埃希菌：尿液364株，血液30株，痰液40株，其他80株。
2.2 耐药率
3 讨论
大肠埃希菌感染是引起医院感染的病原菌之一，且临床耐药率极高. 产ESBLs菌株对氨曲南及第三、四代头孢菌素的耐药率高，而对碳青霉烯类、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率较低，尤其是碳青霉烯类抗菌药物，仍然是治疗产ESBLs菌株感染最敏感药物。因此，对于具有产ESBLs菌株感染 高危因素的大肠埃希菌感染病例，不建议使用氨曲南或第三、四代头孢菌素，而益选择碳青霉烯类或哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦，其中，碳青霉烯类是治疗重症感染的最佳选择。大肠埃希菌的多重耐药给临床治疗带来困难 ，应注意加强监测该菌的药敏变化、细菌耐药谱，有针对性地选用敏感性强的抗菌药物，对防止多重耐药菌的出现有极其重要的临床意义。值得注意的是，不同标本分离大肠埃希菌的耐药率存在一定的差异，尿液中分离的大肠埃希菌总耐药率明显高于血液，痰和其他标本，这与尿液标本大肠埃希菌 ESBLs检出率高有关，与文献报道类似血液，尿液，其他标本中分离的大肠埃希菌组间总耐药率得差异无统计学意义。
本研究结果提示，感染部位不同可能是诱发大肠埃希菌耐药性差异的原因之一。 建议临床医师在治疗不同部位大肠埃希 菌引起的感染时，要考虑由于感染部位不同而产生的耐药性差异，应根据药敏结果合理使用抗菌药。
参考文献
[1]郭珊.产超广谱B一内内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析.中国 微生态学杂确良志，2004，16（3）：65—68.
[2]叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程.第三版.南京：东南大 学出版社，1997.500—514.
[3]汪复.革兰阴性（G一）杆菌对8一内酰胺酶类的耐药性及防治.中 华传染病杂志，2000，18（3）：207—210.
[4] 刘红军，邓文国，刘倩 . 2011年临床病原菌分布及耐药性分析 . 国际检验医学杂志 ， 2012年 33卷 第07期
[5] 胡雪飞，廖晚珍，孙爱娣 . 临床分离主要病原菌的感染分布及耐药性监测 . 实验与检验医学 ， 2010年 28卷 第06期
[6] 周秀珍，刘建华，张智杰 . 1999-2010年产ESBLs大肠埃希菌的感染分布及耐药性分析 . 中华医院感染学杂志 ， 2012年 22卷 第19期
【关键词】 大肠埃希菌 耐药性 抗菌药物
大肠埃希菌为革兰阴性杆菌，常栖居在人和动物的肠道内，亦可存在于自然环境中。大肠埃希菌是人类主要的条件致病菌，通常情况下不致病，当移位于肠外组织及器官时，则引起肠外感染。近年来随着广谱抗菌药物广泛应用，特别是第三代头孢菌素等不合理使用，产ESBLs的菌株日渐增多。且对第三代头孢菌素等呈现多重耐药倾向，给临床治疗带来很大的困难，应引起临床医师的高度重视。为了解喀什二院临床分离的大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药性及不同标本中大肠埃希菌的耐药性差异，为临床提供诊断和用药的依据，现对我院2015年1月～2016年1月临床送检的血液、尿液、痰和其他标本进行鉴定和耐药性监测，报告如下。
1 材料和方法
1.1 菌株来源
1152株大肠埃希菌均来自喀什地区第二人民医院检验2015年1月～2016年1月临床各科所送的血液、尿液、痰和其他（脓液、胆汁、胸腹水、各种穿刺液及分泌物）标本分离于同一病人不同时间的细菌，如果鉴定和药敏结果相同则只按一株计算。
1.2 仪器及材料
法国生物梅里埃公司VITEK2全自动细菌分析系统， M-H琼脂平板、哥伦比亚血琼脂平板、巧克力琼脂平板为梅里埃公司产品，药敏纸片为英国Oxoid公司产品，质控菌株大肠埃希菌ATCC25922.
1.3 方法
菌株的分离与鉴定标本的分离培养严格按照《全国临床检验操作规程》要求进行。血培养把装有患者血液标本的快速血培养瓶放入快速血培养仪内，阳性报警取出转种哥伦比亚血琼脂平板和伊红美蓝；尿培养取10uL尿液标本划线接种于哥伦比亚血琼脂平板和伊红美蓝上；痰培养将患者痰液分别接种于哥伦比亚血琼脂平板，伊红美蓝和嗜血巧克力平板；其他标本则根据项目选择合理的培养基放置35℃二氧化碳培养箱培养24h。对平板上灰白、光滑湿润、圆凸大的可疑菌落进行革兰氏染色，镜下发现中等大小阴性杆菌，采用法国生物梅里埃公司VITEK2全自动鉴定系统及配套的药敏条进行鉴定。超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的筛选和确证试验严格按照美国临床实验室国家标准化委员会（NCCLS）2013 年版制定的规则及标准进行。
1.4 统计方法
用SPSS 20.0 统计软件进行统计学分析血液、尿液、痰液、其他标本四种标本来源的大肠埃希菌组间耐药率比较采用 Friedman 检验，以 P< 0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 菌株总数及分布
我院2015年1月～2O16年1月临床各科共分离大肠埃希菌1152株（28.8%）按标本来源分为尿液标本701株（60.8%）、血液标本 90株（7.8%）、痰标本 90株（7.8%）、痰标本为7.8%、其它标本（包括脓液、胆汁、胸腹水、各种穿刺液及分泌物） 为273株（23.7%）。多重耐药菌大肠埃希菌：尿液364株，血液30株，痰液40株，其他80株。
2.2 耐药率
3 讨论
大肠埃希菌感染是引起医院感染的病原菌之一，且临床耐药率极高. 产ESBLs菌株对氨曲南及第三、四代头孢菌素的耐药率高，而对碳青霉烯类、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率较低，尤其是碳青霉烯类抗菌药物，仍然是治疗产ESBLs菌株感染最敏感药物。因此，对于具有产ESBLs菌株感染 高危因素的大肠埃希菌感染病例，不建议使用氨曲南或第三、四代头孢菌素，而益选择碳青霉烯类或哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦，其中，碳青霉烯类是治疗重症感染的最佳选择。大肠埃希菌的多重耐药给临床治疗带来困难 ，应注意加强监测该菌的药敏变化、细菌耐药谱，有针对性地选用敏感性强的抗菌药物，对防止多重耐药菌的出现有极其重要的临床意义。值得注意的是，不同标本分离大肠埃希菌的耐药率存在一定的差异，尿液中分离的大肠埃希菌总耐药率明显高于血液，痰和其他标本，这与尿液标本大肠埃希菌 ESBLs检出率高有关，与文献报道类似血液，尿液，其他标本中分离的大肠埃希菌组间总耐药率得差异无统计学意义。
本研究结果提示，感染部位不同可能是诱发大肠埃希菌耐药性差异的原因之一。 建议临床医师在治疗不同部位大肠埃希 菌引起的感染时，要考虑由于感染部位不同而产生的耐药性差异，应根据药敏结果合理使用抗菌药。
参考文献
[1]郭珊.产超广谱B一内内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析.中国 微生态学杂确良志，2004，16（3）：65—68.
[2]叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程.第三版.南京：东南大 学出版社，1997.500—514.
[3]汪复.革兰阴性（G一）杆菌对8一内酰胺酶类的耐药性及防治.中 华传染病杂志，2000，18（3）：207—210.
[4] 刘红军，邓文国，刘倩 . 2011年临床病原菌分布及耐药性分析 . 国际检验医学杂志 ， 2012年 33卷 第07期
[5] 胡雪飞，廖晚珍，孙爱娣 . 临床分离主要病原菌的感染分布及耐药性监测 . 实验与检验医学 ， 2010年 28卷 第06期
[6] 周秀珍，刘建华，张智杰 . 1999-2010年产ESBLs大肠埃希菌的感染分布及耐药性分析 . 中华医院感染学杂志 ， 2012年 22卷 第19期