MCHR2在CHO细胞中的稳定表达及其信号通路分析

来源 :中国药理学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lajiub1987
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目的 构建人MCHR2基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并分析MCHR2介导的信号转导通路。方法 采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞系,经RT—PCR和Western blot鉴定后,通过测定细胞内cAMP、Ca^2+浓度的改变分析MCHR2的信号转导通路。结果 成功构建了pcDNA3.1-MCHR2真核表达载
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