【摘 要】
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目的 探讨白细胞介素(IL)-12基因及微小RNA(miR)-127基因共转染后的人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)是否拥有更为持久、稳定的抗肿瘤作用。方法 选取2021年7月至2021年9月就诊于厦门大学附属第一医院分娩产妇的人脐带组织及卵巢癌患者的卵巢癌组织,贴壁法分离hUC-MSCs;慢病毒转染IL-12基因及miR-127基因;定量反转录聚合酶连锁反应(qRT-PCR)、免疫印迹实验(W
【基金项目】
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厦门市医疗卫生科技计划项目(3502Z20194011); 国家自然科学基金(82271678); 福建省科技创新平台建设计划项目(2021Y2019); 福建省自然科学基金面上项目(2021J011347);
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目的 探讨白细胞介素(IL)-12基因及微小RNA(miR)-127基因共转染后的人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)是否拥有更为持久、稳定的抗肿瘤作用。方法 选取2021年7月至2021年9月就诊于厦门大学附属第一医院分娩产妇的人脐带组织及卵巢癌患者的卵巢癌组织,贴壁法分离hUC-MSCs;慢病毒转染IL-12基因及miR-127基因;定量反转录聚合酶连锁反应(qRT-PCR)、免疫印迹实验(Western-Blot)、侵袭、迁移、酶联免疫吸附试验(ELISA)等明确IL-12基因修饰的h UC-MSCs联合miR-127基因在卵巢癌中发挥的作用。结果 在人卵巢腺癌(OVCAR3)细胞增殖方面,h UC-MSC组的OVCAR3细胞较空白(Mock)对照组增加[OD450:(2.26±0.13)vs.(2.71±0.14),P<0.01],hUC-MSC/IL-12+miR-127组较h UC-MSC/NC组减弱[OD450:(2.62±0.12)vs.(2.25±0.13),P<0.01];在细胞迁移方面,h UC-MSC组的OVCAR3细胞较Mock对照组增强[迁移数量:(173.70±5.13)vs.(322.00±14.18),P<0.01],hUC-MSC/IL-12+miR-127组较hUC-MSC/NC组减弱[迁移数量:(313.70±27.79)vs.(133.30±8.33),P<0.01];在细胞侵袭方面,hUC-MSC组的OVCAR3细胞较Mock对照组增强[侵袭数量:(105.00±15.72)vs.(172.30±14.74),P<0.01],h UC-MSC/IL-12+miR-127组较hUC-MSC/NC组减弱[侵袭数量:(88.33±7.64)vs.(53.67±11.24),P<0.01];在细胞划痕创伤修复方面,hUC-MSC/IL-12+miR-127组较hUC-MSC/NC组增强[创伤率:(1.33±0.71)vs.(22.53±1.72),P<0.01]。在卵巢癌类器官增殖方面,hUC-MSC/IL-12+miR-127组较hUCMSC/NC组减弱[细胞存活率:(1.01±0.05)vs.(0.33±0.10),P<0.01],hUC-MSC/IL-12+miR-127组较hUC-MSC/IL-12组减弱[细胞存活率:0.53±0.11)vs.(0.33±0.10),P<0.05]。结论 hUC-MSCs具有明显的靶向归巢作用,可作为肿瘤靶向治疗的理想载体。慢病毒携带IL-12基因及miR-127基因转染hUC-MSCs对卵巢癌具有更为持久、稳定抗肿瘤作用。
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