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摘要：目的 建立七味红花殊胜散质量标准。方法 采用薄层色谱法对处方中诃子、獐牙菜进行定性鉴别。采用高效液相色谱法对制剂中羟基红花黄色素A进行定量测定，光电二极管阵列检测器，色谱柱为CAPCELL PAK MG C18（4.6 mm×250 mm，5 ?m），流动相为甲醇-0.4%磷酸（30∶70），流速1.0 mL/min，检测波长为403 nm，柱温为30 ℃。结果 薄层色谱能定性检出诃子、獐牙菜，斑点清晰，且阴性对照无干扰。羟基红花黄色素A在0.304～2.280 ?g范围内呈良好的线性关系，r=0.999 8，加样回收率为97.92%，RSD=0.94%。结论 本方法操作简便、专属性、重复性好，可有效控制七味红花殊胜散的质量。
关键词：七味红花殊胜散；薄层色谱法；高效液相色谱法；质量标准；羟基红花黄色素A
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.06.016
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）06-0043-03
七味红花殊胜散收载于《卫生部药品标准·藏药》第一册，由红花、天竺黄、獐牙菜、诃子、麻黄、木香马兜铃、五脉绿绒蒿组成，用于新旧肝病、劳伤引起的肝血增盛、肝肿大、巩膜黄染、食欲不振[1]。原标准有显微鉴别、麻黄薄层鉴别、诃
子中没食子酸的含量测定及常规检查项，为了更有效地控制该药的质量，本试验对诃子、獐牙菜进行鉴别，采用高效液相色谱法（HPLC）对处方中君药红花的有效成分羟基红花黄色素A进行含量测定，现报道如下。
1 仪器与试药
Waters-e2695高效液相色谱仪，CAPCELL PAK MG C18 （4.6 mm×250 mm，5 ?m），PDAD检测器。
诃子对照药材（批号121015-200503）、獐牙菜苦苷对照品（批号0975-200203）、羟基红花黄色素A对照品（批号110831- 200302）均购自中国药品生物制品检定所；七味红花殊胜散（批号110401、110402、110403）由甘肃省甘南藏药制药有限公司提供；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 薄层色谱鉴别
2.1.1 诃子 取本品3 g，加乙醇15 mL，超声处理30 min，滤过，滤液浓缩至5 mL，作为供试品溶液。按照处方比例及工艺，取除诃子的其他药材制成阴性样品，按照供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。取诃子对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法[2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅥB]试验，吸取上述3种溶液各5 ?L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-环己烷（5∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，且阴性对照无干扰。
2.1.2 獐牙菜 取本品3 g，加甲醇25 mL，超声处理30 min，滤过，滤液浓缩至5 mL，作为供试品溶液。按照处方比例及工艺，取除獐牙菜的其他药材制成阴性样品，按照供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。取獐牙菜苦苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法[2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅥB]试验，吸取上述3种溶液各5 ?L，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（30∶10∶3）放置10 ℃以下的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254 nm下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，且阴性对照无干扰。
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件 色谱柱选用CAPCELL PAK MG C18（4.6 mm×250 mm，5 ?m）；流動相：甲醇-0.4%磷酸（30∶70），流速：1.0 mL/min；检测波长：403 nm；柱温：30 ℃。
2.2.2 对照品溶液的制备 取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25%甲醇制成0.152 mg/mL的溶液，即得。
2.2.3 供试品溶液的制备 取本品约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加25%甲醇25 mL，密塞，称定质量，超声处理（功率300 W，频率40 kHz）40 min，放冷，再称定质量，用25%甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.2.4 阴性对照溶液的制备 按处方比例及制备工艺配制不含红花的阴性样品，并按“2.2.3”项下方法制成阴性对照溶液。
2.2.5 专属性试验 分别精密吸取羟基红花黄色素A对照品溶液和七味红花殊胜散供试品溶液各10 ?L，并注入液相色谱仪，测定，即得。结果见图1。
关键词：七味红花殊胜散；薄层色谱法；高效液相色谱法；质量标准；羟基红花黄色素A
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.06.016
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）06-0043-03
七味红花殊胜散收载于《卫生部药品标准·藏药》第一册，由红花、天竺黄、獐牙菜、诃子、麻黄、木香马兜铃、五脉绿绒蒿组成，用于新旧肝病、劳伤引起的肝血增盛、肝肿大、巩膜黄染、食欲不振[1]。原标准有显微鉴别、麻黄薄层鉴别、诃
子中没食子酸的含量测定及常规检查项，为了更有效地控制该药的质量，本试验对诃子、獐牙菜进行鉴别，采用高效液相色谱法（HPLC）对处方中君药红花的有效成分羟基红花黄色素A进行含量测定，现报道如下。
1 仪器与试药
Waters-e2695高效液相色谱仪，CAPCELL PAK MG C18 （4.6 mm×250 mm，5 ?m），PDAD检测器。
诃子对照药材（批号121015-200503）、獐牙菜苦苷对照品（批号0975-200203）、羟基红花黄色素A对照品（批号110831- 200302）均购自中国药品生物制品检定所；七味红花殊胜散（批号110401、110402、110403）由甘肃省甘南藏药制药有限公司提供；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 薄层色谱鉴别
2.1.1 诃子 取本品3 g，加乙醇15 mL，超声处理30 min，滤过，滤液浓缩至5 mL，作为供试品溶液。按照处方比例及工艺，取除诃子的其他药材制成阴性样品，按照供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。取诃子对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法[2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅥB]试验，吸取上述3种溶液各5 ?L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-环己烷（5∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，且阴性对照无干扰。
2.1.2 獐牙菜 取本品3 g，加甲醇25 mL，超声处理30 min，滤过，滤液浓缩至5 mL，作为供试品溶液。按照处方比例及工艺，取除獐牙菜的其他药材制成阴性样品，按照供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。取獐牙菜苦苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法[2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅥB]试验，吸取上述3种溶液各5 ?L，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（30∶10∶3）放置10 ℃以下的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254 nm下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，且阴性对照无干扰。
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件 色谱柱选用CAPCELL PAK MG C18（4.6 mm×250 mm，5 ?m）；流動相：甲醇-0.4%磷酸（30∶70），流速：1.0 mL/min；检测波长：403 nm；柱温：30 ℃。
2.2.2 对照品溶液的制备 取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25%甲醇制成0.152 mg/mL的溶液，即得。
2.2.3 供试品溶液的制备 取本品约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加25%甲醇25 mL，密塞，称定质量，超声处理（功率300 W，频率40 kHz）40 min，放冷，再称定质量，用25%甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.2.4 阴性对照溶液的制备 按处方比例及制备工艺配制不含红花的阴性样品，并按“2.2.3”项下方法制成阴性对照溶液。
2.2.5 专属性试验 分别精密吸取羟基红花黄色素A对照品溶液和七味红花殊胜散供试品溶液各10 ?L，并注入液相色谱仪，测定，即得。结果见图1。