结核分枝杆菌 mpt59和 esxA 融合基因编码蛋白的原核表达及免疫原性观察

来源 :郑州大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zql0913
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目的:获取结核分枝杆菌mpt59和esxA基因编码的原核表达融合蛋白,并将该蛋白初步用于结核患者的快速诊断。方法:PCR扩增含有柔性链接肽段的esxA核苷酸序列,并将其连接至原核表达载体pET28a上,再将mpt59连接至pET28a-esxA上。该融合蛋白在大肠杆菌BL21中原核表达后,用镍珠子进行亲和纯化。采用垂直电泳和免疫印迹分析重组蛋白,并用于结核患者的诊断。结果:成功构建了原核表达载体pET28a-esxA-mpt59,转化大肠杆菌BL21后经诱导产生了高水平的表达产物。用该纯化蛋白进行ELIS
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