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目的
制备Integrin αvβ3/CCR2双靶向微泡,对其一般理化性质、体外显影效果及寻靶能力进行检测。
方法以FITC标记iRGD肽,PE标记抗CCR2单抗,采用巯基-马来酰亚胺连接法及生物素-亲和素桥连法制备携iRGD肽和抗CCR2单抗的双靶向微泡(MBdual-target),并制备空白微泡(MB control)检测各组微泡的一般理化性质,在荧光显微镜下观察两组微泡荧光显示,流式细胞仪检测两组微泡FITC及PE荧光含量。观察并比较两组微泡体外显影效果及稳定性。光学显微镜及荧光显微镜下观察两组微泡与小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)的黏附情况。
结果①MBdual-target粒径为(0.93±0.23)μm,与空白微泡粒径差异无统计学意义(P>0.05);②荧光显微镜下观察,MBcontrol组微泡无荧光显示,MBdual-target组微泡表面既显示绿色荧光又显示红色荧光;③体外显影实验显示,MBdual-target组微泡与MBcontrol组微泡的体外显影强度差异无统计学意义(P>0.05);④体外寻靶实验显示,MB dual-target组微泡能聚集结合于bEnd.3细胞表面。
结论成功制备了Integrin αvβ3 /CCR2双靶向微泡,其具有良好的体外显影效果及寻靶能力。