【摘 要】
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目的 观察IKB激酶B(IKKβ)小干扰RNA(siRNA)对耐替莫唑胺(TMZ)的胶质瘤细胞凋亡的影响,探讨IKKβ siRNA增敏耐药细胞TMZ化疗的机制。方法构建人胶质瘤耐药细胞株TR-U251和TR-LN229细胞,随机分为对照组、50μmol/LIKβsiRNA转染组、低浓度IC20 TMZ治疗组以及50μmol/LIKKβsiRNA+IC2。TMZ联合治疗组,流式细胞术检测细胞凋亡率,
【机 构】
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天津市环湖医院神经外科天津市脑血管与神经变性重点实验室,300060,吉林大学第一医院神经外科,天津市环湖医院神经外科天津市脑血管与神经变性重点实验室,300060
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目的 观察IKB激酶B(IKKβ)小干扰RNA(siRNA)对耐替莫唑胺(TMZ)的胶质瘤细胞凋亡的影响,探讨IKKβ siRNA增敏耐药细胞TMZ化疗的机制。方法构建人胶质瘤耐药细胞株TR-U251和TR-LN229细胞,随机分为对照组、50μmol/LIKβsiRNA转染组、低浓度IC20 TMZ治疗组以及50μmol/LIKKβsiRNA+IC2。TMZ联合治疗组,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)表达,以及干扰前后核转录因子.KB(NF-KB)p65、0^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、Survivin蛋白表达水平。结果TR-U251细胞凋亡率分别为:对照组(2.78±1.67)%、干扰组(11.92±3.06)%、120txmol/LTMZ治疗组(8.18±2.24)%、联合治疗组(35.95±6.07)%;TR-LN229细胞凋亡率分别为:对照组(1.824-0.86)%、干扰组(9.784-4.13)%、60μmol/LTMZ组(8.65±3.64)%、联合治疗组(28.30±4.97)%,两种细胞联合治疗组凋亡率较对照组和单独用药组均显著增加(P〈0.01),联合治疗组bcl-2水平均显著降低,Caspase-3水平均增加;IKK[3RNA干扰后NF-KB、MGMT及Survivin蛋白表达抑制。结论IKK[3RNA干扰通过显著降低TR-U251与TR-LN229中NF-KB、MGMT及Survivin蛋白表达,增高TMZ化疗的凋亡率。
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