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目的：应用TaqMan实时荧光定量RT-PCR技术，建立定量检测CK19 mRNA的方法。方法：采用RT-PCR从胃癌细胞中克隆CKl9片段（230bp），装入pMD18-T Simple载体。纯化质粒，制备荧光定量PCR标准品。应用LightCycle荧光定量PCR仪检测标准品、30例正常人外周血和5例肿瘤组织CK19 mRNA。结果：PCR扩增及测序均证实CK19 cDNA片段重组到pMD 18-T载体上，建立了稳定的检测CK19 mRNA的标准，即设定CT值在35个循环之内，检测结果低于100个拷贝