二氧化硅刺激矽肺肺泡巨噬细胞上清介导的人胚肺成纤维细胞Ⅲ型胶原和Ⅲ型前胶原的表达

来源 :中华劳动卫生职业病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tscy123
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目的 探讨经SiO2刺激的肺泡巨噬细胞(AM)通过人胚肺成纤维细胞(HELF)对Ⅲ型胶原(CⅢ)和Ⅲ型前胶原(pCⅢ)表达的影响及抗TGF-β1抗体的干预作用.方法 收集矽肺患者AM,将其分为加入SiO2粉尘悬液的处理组和仅加入无血清培养液的对照组.培养18 h后获取培养上清.将原代培养的HELF分为:(1)处理组:加入经SiO2刺激的AM上清;(2)对照组:加入未经SiO2刺激的AM上清;(3)空白对照组:仅加入含体积分数为3%胎牛血清的DMEM;(4)处理组+抗转化生长因子β1(TGF-β1)抗体干预组:在处理组的基础上加上抗TGF-β1抗体(10 μg/ml);(5)对照组+抗TGF-β1抗体干预组:在对照组的基础上加上抗TGF-β1抗体(10 μg/ml).前3组分别培养6、12、18、24、36、48 h,后2组分别培养18、24、36 h,用免疫细胞化学法检测HELF中pCⅢ的表达,用免疫印迹(Western blot)法检测HELF条件培养上清中CⅢ的表达.结果 与对照组(0.1212±0.0079、0.1414±0.0058、0.1620±0.0081、0.1965±0.0103、0.1715±0.0116)相比,处理组12、18、24、36和48 h pCⅢ表达(0.1423±0.0107,0.1624±0.0011,0.1925±0.0056,0.2421±0.0097,0.2102±0.0103)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).与对照组(0.2296±0.0121、0.2778±0.0116、0.3367±0.0269、0.3722±0.0214)相比,处理组12、18、24、36、48 hCⅢ含量(0.2559±0.0061、0.3249±0.0110、0.4171±0.0193、0.5441±0.0452、0.4751±0.0252)明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).与同期相对应的非干预组相比,18、24、36 h抗TGF-β1抗体干预组CⅢ和pCⅢ均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05).结论 SiO2经AM的介导,诱导HELF高表达CⅢ和pCⅢ,部分效应是通过TGF-β1起作用.
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