观察不同强度的循环动态拉伸(CTS)对原代培养的兔膝关节软骨细胞糖胺多糖(GAG)合成的影响。

1个月龄新西兰兔6只，无菌手术切取双膝关节软骨，采用0.4% Pronase酶和0.025% Ⅱ型胶原酶消化分离得到关节软骨细胞，来源于同一只兔的软骨细胞分为3部分，分别接种在3块BioFlex培养板上，通过Flexercell 5000系统对单层培养的兔膝软骨细胞施加CTS刺激，加载条件为0.3 Hz正弦波形，时长为6 h/d，加载强度分别为0%、5%、15%的CTS刺激。于加载后24、36、48和60 h用倒置显微镜观察细胞形态，并分别抽取上清用阿尔新蓝染色沉淀法测量GAG浓度。采用重复测量资料的单因素方差分析比较不同强度CTS刺激组上清液中GAG浓度的差异。

细胞力学加载后可见周边部软骨细胞由多角形变为纺锤形，沿培养皿半径垂直方向排列。随拉伸强度的增加，上清中GAG浓度依次上升，各组总平均浓度分别为[(4.7±1.3)比(6.3±1.1)比(8.0±1.8) ng/ml]，差异有统计学意义(F＝15.970，P＝0.000)；同一时间点，随CTS拉伸强度的增大，上清液中GAG的含量逐渐增高，各时间点3组浓度分别为[24 h：(2.3±0.5)比(3.3±0.6)比(3.9±0.6) ng/ml；36 h：(4.0±0.7)比(4.6±0.8)比(6.8±0.2) ng/ml；48 h：(5.5±0.7)比(6.8±0.7)比(8.5±0.8) ng/ml；60 h：(6.9±1.2)比(10.8±1.3)比(13.0±1.1) ng/ml]，且差异有统计学意义(F＝6.062，P＝0.036；F＝16.720，P＝0.004；F＝12.570，P＝0.007；F＝19.790，P＝0.002)，同一采样时间采用组间LSD法两两比较差异均有统计学意义。随加载总时间增加，上清中GAG浓度逐渐增加，各组分别为[0% CTS组：(2.3±0.5)比(4.0±0.7)比(5.5±0.7)比(6.9±1.2) ng/ml；5% CTS组：(3.3±0.6)比(4.6±0.8)比(6.8±0.7)比(10.8±1.3) ng/ml；15% CTS组：(3.9±0.6)比(6.8±0.2)比(8.5±0.8)比(13.0±1.1) ng/ml]，且差异有统计学意义(0% CTS组：F＝4.640，P＝0.037；5% CTS组：F＝23.580，P＝0.000；15% CTS组：F＝9.638，P＝0.005)。且加载总时间与加载强度之间存在交互效应，时间越长，加载组上清中GAG浓度越大。

CTS可促进单层贴壁兔膝关节软骨细胞合成GAG，作用效果随拉伸强度和时间的增加而增大。