【摘 要】
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目的观察右美托咪定（dexmedetomidine, Dex）对大鼠离体心脏缺血／再灌注损伤中微管相关蛋白1轻链3 (microtubule-associated protein 1 light 3, LC3）及磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B(phosphatidy-linositol 3-kinase/protein kinase B, PI3K/Akt）信号通路的影响，探讨Dex对心肌的保护作
【机 构】
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复旦大学附属儿科医院麻醉科，上海 201102,复旦大学附属儿科医院麻醉科，上海 201102,徐州医科大学江苏省麻醉学重点实验室，江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室 221004,
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目的观察右美托咪定（dexmedetomidine, Dex）对大鼠离体心脏缺血／再灌注损伤中微管相关蛋白1轻链3 (microtubule-associated protein 1 light 3, LC3）及磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B(phosphatidy-linositol 3-kinase/protein kinase B, PI3K/Akt）信号通路的影响，探讨Dex对心肌的保护作用。
方法健康成年雄性SD大鼠48只，8~10周龄，体重250~300 g，采用Langendorff灌注装置制备离体心脏缺血／再灌注模型。取模型制备成功的心脏48个，采用随机数字表法将其分为4组（n=12）：空白对照组（NC组），K-H液持续灌注120 min；缺血／再灌注组（I/R组），K-H液灌注30 min，全心缺血30 min，再灌注60 min；Dex预处理组（Dex+I/R组），K-H液灌注10 min后再用含有25 μg/L Dex的K-H液灌注15 min, K-H液洗脱5 min，全心缺血30 min，再灌注60 min; Dex预处理+渥曼青霉素组（Dex+I/R+W组），开胸前30 min大鼠腹腔注射渥曼青霉素15 μg/kg，其余处理同Dex+ I/R组。于平衡末（K-H液灌注30 min时）及再灌注末记录心率、左心室内压力上升/下降速率最大值（the maximum rate of increase or decrease of left ventricular pressure, ±dp/dtmax）、左心室发展压（left ventricular development pressure, LVDP）、左心室舒张末期压（left ventricular diastolic pressure, LVEDP）。于再灌注末收集冠状动脉流出液积，酶标仪法检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）活性；取心肌组织，2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyltetrazoliumchlofide, TTC）染色法检测心肌梗死面积，计算心肌梗死面积百分比；采用Western blot法检测自噬标记物LC3以及Akt、磷酸化蛋白激酶B （phosphorylated Akt, p-Akt ）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin, mTOR ）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（phosphorylated mTOR, p-mTOR）表达量。
结果与NC组比较，其余各组HR、±dp/dtmax、LVDP降低，LVEDP、心肌梗死面积、冠状动脉流出液LDH活性升高，心肌LC3-Ⅱ表达上调，p-Akt及p-mTOR表达下调（P均<0.05 ）。与I/R组比较，Dex+I/R组心率、±dp/dtmax、LVDP增加，LVEDP、心肌梗死面积、冠状动脉流出液LDH活性降低，心肌LC3-Ⅱ表达下调，p-Akt及p-mTOR表达上调（P均<0.05）。与Dex+I/R组比较，Dex+I/R+W组心率、±dp/dtmax、LVDP降低, LVEDP、心肌梗死面积、冠状动脉流出液LDH活性升高，心肌LC3-Ⅱ表达上调，p-Akt及p-mTOR表达下调（P均<0.05 ）。
结论Dex预处理对离体大鼠心脏缺血／再灌注损伤具有保护作用，且该作用可能与PI3K/Akt信号通路激活，引起下游mTOR活性增强从而降低缺血／再灌注期间心肌细胞的自噬水平有关。
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