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目的 建立简单有效的L- 天冬酰胺酶分离纯化工艺，研究L-天冬酰胺酶的特性。方法 采用冷丙酮破壁处理，经稀碱液抽提、离子交换层析和亲和层析进行纯化。通过温度试验、pH试验、SDS－PAGE图谱、紫外吸收光谱等研究酶的特性。结果 建立了简单高效的纯化工艺，可使L-天冬酰胺酶的纯度达94．4％，比活为520u/mg蛋白，总收率为65．7％。L-天冬酰胺酶的相对分子质量分别为143900和166700，均为有抗癌活性的EC－2组分，在270nm有最大吸收。最适作用温度为40－50℃，最适作用州为8.0-9.0在40℃以下能保持稳定。结论建立了大肠杆菌L-天冬酰胺酶的分离纯化工艺，并研究了L-天冬酰胺酶的酶学特性。