新趋化因子VCC-1小干扰RNA真核表达载体的构建及鉴定

来源 :四川大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：gongpeng

【摘要】

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目的构建对VCC-1基因有特异性抑制作用的小干扰RNA（siRNA）表达载体。方法根据VCC-1mRNA序列，按照siRNA设计原则设计4条特异性的寡核苷酸序列及阴性对照，分别克隆到pGPU6／GFP／Neo载

【作者】

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牟霞陈瑶王穗海黄湘李明

【机构】

：

南方医科大学生物技术学院,贵州省疾病预防控制中心

【出处】

：

四川大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2009年4期

【关键词】

：

VCC-1 小干扰RNA表达载体 SMMC7721细胞 RNA干扰

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目的构建对VCC-1基因有特异性抑制作用的小干扰RNA（siRNA）表达载体。方法根据VCC-1mRNA序列，按照siRNA设计原则设计4条特异性的寡核苷酸序列及阴性对照，分别克隆到pGPU6／GFP／Neo载体中。酶切鉴定和测序验证阳性克隆。用脂质体转染SMMC7721细胞，以RT-PCR分析其对VCC-1mRNA表达的影响。结果经酶切、测序鉴定均证实重组质粒构建成功。pGPU6／GFP／Neo—siRNA、B、C、D载体均能抑制SMMC7721细胞VCC-1基因mRNA的表达，其中重组质粒C抑制作用最

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