HER-2/neu siRNA表达载体的构建及对人乳腺癌细胞株的影响

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目的:探讨siRNA 对人乳腺癌细胞株SK-BR-3 的HER-2/neu基因表达的影响.方法:以HER-2/neu mRNA 序列为模板设计合成2对siRNA 序列,构建pGenesil-1-HER-2/neu siRNA 重组质粒,转化感受态的大肠杆菌,质粒酶切、测序鉴定.转染SK-BR-3 细胞48 h后,提取RNA 进行RT-PCR,采用方差分析(ANOVA),分析RNA 干扰效应.结果:成功构建了pGenesil-1-HER-2/neu siRNA 重组质粒,成功转染SK-BR-3 细胞.重组质粒抑制HER-2/neu基因的表达接近54.45 %( P =0.000).结论: HER-2/neu siRNA 重组质粒明显下调HER-2/neu 基因在乳腺癌细胞中的表达.
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