【摘 要】
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目的:探讨针刺疗法对去卵巢大鼠核因子Kappa B受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)信号通路的影响,并分析其调控骨代谢平衡的机制.方法:选择SPF级雌性Wistar大鼠60只,按照
【机 构】
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甘肃中医药大学附属医院,甘肃兰州730020
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目的:探讨针刺疗法对去卵巢大鼠核因子Kappa B受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)信号通路的影响,并分析其调控骨代谢平衡的机制.方法:选择SPF级雌性Wistar大鼠60只,按照随机数字表法分为空白组、模型组、雌二醇组和针刺组,每组15只.除空白组外,其他3组大鼠均采用去卵巢法建立骨质疏松模型.造模成功后进行为期12周的干预,空白组、模型组大鼠给予0.9％ NaC1溶液50 μg/(kg·d)灌胃,雌二醇组给予戊酸雌二醇50 μg/(kg· d)灌胃,针刺组给予电针刺激肾俞、三阴交、关元、足三里等穴位,刺激强度2mA,频率2 Hz,15 min/次,1次/d.采用酶联免疫法(ELISA)分析4组大鼠血清中骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、I型胶原羧基末端肽(CTX-I)、核结合因子-α1(CBF-α1)、I型前胶原氨基端前肽(PINP)、骨钙素(OC)等骨代谢标志物含量;采用Micro-CT分析股骨远端骨密度(BMD)、相对骨体积(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、连接密度(Conn.D)、骨小梁分离度(Tb.Sp)、骨小梁数量(Tb.N)、结构模型指数(SMI)等;采用TUNEL法检测大鼠股骨远端细胞凋亡情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blotting)和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠股骨和下丘脑组织中RANKL、OPG蛋白和mRNA表达水平.结果:①骨密度及骨代谢标志物:与空白组比较,模型组BMD、BALP、CBF-α1、CTX-I、PINP、OC均明显降低(P＜0.05).与模型组比较,针刺组BMD、BALP、CBF-α1、CTX-I、PINP、OC均明显升高(P＜0.05).②骨小梁微结构:与空白组比较,模型组BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Conn.D均明显降低,Tb.Sp、SMI均明显升高(P＜0.05).与模型组比较,针刺组BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Conn.D均明显升高,Tb.Sp、SMI均明显降低(P＜0.05).③骨远端细胞凋亡情况:与空白组比较,模型组凋亡细胞数量明显增加;与模型组比较,雌二醇组、针刺组干预后大鼠股骨远端细胞凋亡数量均明显减少.④下丘脑及股骨组织OPG、RANKL mRNA和蛋白表达:与空白组比较,模型组下丘脑、股骨中OPG mRNA和蛋白表达均明显降低,RANKL mRNA和蛋白表达均明显升高(P＜0.05).与模型组比较,针刺组下丘脑、股骨中OPG mRNA和蛋白表达均明显上升,RANKL mRNA和蛋白表达均明显下降(P＜0.05).结论:针刺疗法能够改善OP模型大鼠骨密度,调节骨代谢水平,改善骨小梁微结构,其机制可能与RANKL/OPG信号通路调控有关.
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