奥贝胆酸对非酒精性脂肪肝大鼠法尼醇X受体及细胞色素P450家族成员7A1基因表达的影响

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目的探讨奥贝胆酸对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠法尼醇X受体(FXR)蛋白、细胞色素P450家族成员7A1(CYP 7A1)蛋白及其基因表达的影响,及保肝作用。方法雄性SD大鼠52只通过高脂饲料喂养建立大鼠非酒精性脂肪肝模型;设置对照组11只,模型组、奥低组、奥中组和奥高组共41只,给药4周后,取大鼠相同部位肝脏,免疫组织化学法测定FXR蛋白表达、RT-PCR检测FXR mRNA,Western blotting法检测CYP 7A1蛋白、RTPCR检测CYP 7A1 mRNA的表达水平;通过大鼠肝指数,外周血谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)的浓度,及肝脏组织切片观察,评估肝功能。结果高脂饲料喂养10周后,大鼠具有典型的NAFLD特征,模型建立成功。模型组的FXR蛋白和FXR mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05),奥低组和奥中组的FXR蛋白和FXR mRNA表达水平与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05),奥高组的FXR蛋白和FXR mRNA表达水平显著高于模型组(P<0.05);模型组、奥低组和奥中组的吸光度值显著低于对照组(P<0.05),奥高组显著升高,与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。模型组的CYP 7A1蛋白和CYP 7A1 mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05),奥低组和奥中组的CYP 7A1蛋白和CYP 7A1 mRNA的表达水平与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05),奥高组的CYP 7A1蛋白和CYP 7A1 mRNA表达水平显著低于模型组(P<0.05)。与对照组相比,模型组的肝指数(%)显著增大(P<0.05);奥低组和奥中组的肝指数(%)与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05),奥高组肝指数(%)显著低于模型组(P<0.05)。与对照组相比,模型组的ALT、AST和ALP的浓度显著升高(P<0.05);奥贝胆酸组的ALT、AST和ALP浓度显著低于模型组(P<0.05),且随着奥贝胆酸给药量的增加,ALT、AST和ALP的浓度逐渐降低;肝组织切片观察结果显示,奥贝胆酸呈剂量依赖性改善大鼠肝组织。结论奥贝胆酸高剂量能显著上调FXR蛋白及其基因的表达,并抑制CYP 7A1蛋白及其基因的表达,显著改善大鼠肝功能及肝组织病理状态。
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