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目的：构建检测鼻咽癌患者血浆EB病毒（人疱疹病毒4型）DNA的荧光定量PCR标准品。方法：用EB病毒基因高度保守序列设计特异的引物和荧光探针，常规PCR法扩增目的片段，将纯化的PCR产物与PMD-18T载体进行连接，转化宿主菌DH-Sot，然后用PCR初筛和测序分析证实目的片段克隆成功，提取重组质粒DNA，纯化质粒并检测260nm吸光度，确定重组质粒拷贝浓度，并以此制备荧光定量PCR梯度浓度标准品。结果：PCR初筛及测序分析均证实EB病毒DNA重组到PMD-18T载体上。结论：本试验成功克隆EB病毒DNA