【摘 要】
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目的设计和构建cdc2基因敲低的表达siRNA的逆转录病毒重组载体.方法利用在线软件siRNA Selection Program和siDirect设计干扰cdc2基因靶序列,合成回文DNA序列,退火后克隆至线
【机 构】
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苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室
【基金项目】
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国家自然科学基金，江苏省研究生培养创新工程项目
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目的设计和构建cdc2基因敲低的表达siRNA的逆转录病毒重组载体.方法利用在线软件siRNA Selection Program和siDirect设计干扰cdc2基因靶序列,合成回文DNA序列,退火后克隆至线性化pSUPER质粒载体,重组质粒载体扩增、抽提后行双酶切电泳鉴定和测序分析,再转染phoenix细胞,产生逆转录病毒,并利用NIH3T3细胞测定病毒滴度.结果pSUPER表达siRNA重组质粒载体经双酶切电泳鉴定和DNA测序分析,证实插入的60 bp序列与原序列一致,位置正确.pSUPER.ret
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